公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | A01X669 | |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | BT549:BT-549 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹：
別稱 | BT 549 |
種屬 | 人類 |
年齡（性別） | 女性，72歲 |
組織來源 | 乳腺 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
詳情簡介 | BT-549細(xì)胞的來源組織是一個乳頭狀侵入性導(dǎo)管瘤，7個局部淋巴結(jié)中3個已有轉(zhuǎn)移。由此組織建立的BT-549細(xì)胞是多態(tài)性的，包括上皮細(xì)胞樣組分和多核巨細(xì)胞。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | RPMI-1640＋10% FBS＋0.01mg/ml Insulin＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~54-90小時 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
細(xì)胞凍存注意事項：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候，這時細(xì)胞生長狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品：
線粒體離子肽酶1抗體 線粒體促凋亡蛋白抗體 英文名；Smac
CD36抗體 英文名；CD36 突觸融合蛋白3抗體 英文名；STX3
CD53抗體 英文名；CD53 兔抗FITC抗體 英文名；FITC
CD84抗體 英文名；CD84 脫中胚蛋白抗體 英文名；TBR2
CENTG3蛋白抗體 英文名；CENTG3 完整膜蛋白E25A抗體 英文名；ITM2A
COP9信號復(fù)合體亞基3抗體 英文名；COPS3 微管蛋白特定伴侶蛋白E抗體 英文名；TBCE
CSMD2蛋白抗體 英文名；CSMD2 微管相關(guān)同源蛋白TPX2單克隆抗體 英文名；TPX2
Cy5標(biāo)記的網(wǎng)格蛋白重鏈抗體 英文名；Clathrin heavy chain, Cy5 conjugated 維甲酸相關(guān)孤兒受體β抗體 英文名；ROR beta
BT-549人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞Dapper2蛋白抗體 英文名；Dact2 味覺受體蛋白家族2亞基60抗體 英文名；T2R60
DFFA抗體 英文名；DFFA 戊型肝炎病毒抗體 英文名；HEV ORF3
DLST蛋白抗體 英文名；DLST 細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體 英文名；CNOT6
ALL1相關(guān)蛋白抗體 英文名；KMT2D/ALL1 雙特異性蛋白磷酸酶7抗體 英文名；DUSP7
APC-Cy7標(biāo)記人CD23單克隆抗體 英文名；human CD23/APC-Cy7 雙氧化酶2/甲狀腺氧化酶2抗體 英文名；DUOX2
APC標(biāo)記人CD11b單克隆抗體 英文名；human CD11b/APC 瞬時受體電位通道蛋白4抗體 英文名；CABP4
