樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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產(chǎn)品名:高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)檢測(cè)試劑盒
英文名:HMGB-1 ELISA Kit
貨號(hào):FS-E63794
高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):HMGB-1 ELISA Kit 產(chǎn)品別名:小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒廠價(jià)用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本,例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本
服務(wù):可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),以及產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)和技術(shù)指導(dǎo)等
檢測(cè)種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等
保存環(huán)境:2-8℃低溫、避光、防潮
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):ELISA試劑為我司主營(yíng)產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行,并經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測(cè),我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時(shí),且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。
試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
ELISA 試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿(mǎn)意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
注意事項(xiàng)
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9)按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
瓜子金皂苷XXXI(對(duì)照品)英文名稱(chēng): Epothilone B(EPO906, Patupilone) 產(chǎn)品別名: N-甲基辛
瓜子金皂苷己(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): BMS345541產(chǎn)品別名: 1-丁基-3-甲基咪唑乳酸鹽
關(guān)白附(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): IKK16產(chǎn)品別名: 3-氟-4-甲酸甲酯
關(guān)黃柏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Trelagliptin succinate;SYR-472產(chǎn)品別名: 三聚酸*酯
管花苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 2-[2-(2-t-Boc-aminoethoxy)ethoxy]ethanol 產(chǎn)品別名: (2S,6S)-2,6-二叔丁基-2,3,5,6-四氫-1H-咪唑并[1,2-a]咪唑
貫葉金絲桃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 2’,2’-Difluoro-2’-deoxyuridine 產(chǎn)品別名: 4-甲磺?;诫蔓}酸鹽
光甘草定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Micafungin sodium產(chǎn)品別名: 2,6-二甲基喹啉
廣東紫株(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Icariside F2產(chǎn)品別名: 6-溴-2-甲基喹啉
廣防已(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Dovitinib產(chǎn)品別名: 4-(4-溴吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
廣藿香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Acetytastragaloside產(chǎn)品別名: (S)-1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙
廣藿香酮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 5-Phenyl-2,4-pentadienoic acid產(chǎn)品別名: 2-羥基-3-甲氧基苯甲酸
廣金錢(qián)草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Buserelin Acetate產(chǎn)品別名: 5-羥基異喹啉
高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)檢測(cè)試劑盒G氨基丁酸受體β2/GABAA Rβ2抗體 Picroside III 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
G蛋白偶聯(lián)受體17抗體 Daucosterol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
G蛋白偶聯(lián)受體102抗體 β-Carotene 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥90%,標(biāo)準(zhǔn)品
G蛋白偶聯(lián)受體136抗體 Sesamoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
G蛋白偶聯(lián)受體126抗體 Trigonelline Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
G蛋白偶聯(lián)受體105抗體 Cucurbitacin B 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
G蛋白偶聯(lián)受體C5B抗體 Quercitrin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
G蛋白偶聯(lián)受體33抗體 Quercetin-7-O-β-D-glucopyranoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
谷氨酸受體紅藻氨酸離子1抗體 Xanthotol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品