实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
痤疮丙酸杆菌PCR荧光定量检测试剂盒 | Propionibacterium acnesPCR | 多种规格 | BJ-P7193 |
实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建
特点优势：
1. 特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
二、操作步骤 1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。 2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。 3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。 | 三、注意事项 １．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个专用的PCR实验室。 ２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。 ３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。 ４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。 ５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。 ６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。 ７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
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操作流程
1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 所有试剂在使用应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
2 ug pGL4.11[luc2P] pGL4.11[luc2P] 低温运输，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人CD98分子(CD98)ELISA试剂盒
细菌保存培养基 Bacterial Storage Medium 250g
5mg 罗丹明 123 Rhodamine 123 室温干燥保存 15.6-1000 pg/mL 羊特定基因序列(Ovine)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
50次 沉淀法miRNA分离试剂盒 miRNA Isolation Kit 4℃保存 31.2-2000 pg/mL 人八聚体结合转录因子2(OCT2)ELISA试剂盒
含225ml蒸馏水均质袋 10个/包 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Secretory carrier-associated membrane protein 1
2 ug pBC-SK pBC-SK 低温运输，-20℃保存 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Pentosidine
肠毒素产毒培养基(不含琼脂) Enterotoxin Toxigenic Medium 250g
1瓶 Eca-109（GFP）株 Eca-109（GFP） 低温运输和保存 3.12-200 U/L ELISA Kit for Human Ornithine carbamoyltransferase, mitochondrial
250mL Stripping Buffer 3,4X Stripping Buffer 3,4X 常温保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Flotillin-1
2 ug pVLT33 pVLT33 低温运输，-20℃保存醋酸铅培养基 进口、国产Lead Acetate Medium用于硫化氢试验250
50T 百日咳杆菌PCR检测试剂盒 低温运输，-20℃保存 1.56-100 U/mL 人丙酮酸激M2型同工(M2-PK)ELISA试剂盒
痤疮丙酸杆菌PCR荧光定量检测试剂盒BSA PBS-T(含有0.05%Tween-20)缓冲系统封闭液 500ml
硝酸纤维素薄膜(NC膜)0.45μm 9cm×10cm 20片
硝酸纤维素薄膜(NC膜)0.22μm 9cm×10cm 20片
丽春红染色液(1×) 100ml
丽春红染色液(10×) 12ml
Western半干法转膜液(固体)(1×干粉) 1包
Western半干法转膜液(固体)(10×干粉) 1包
WB转印滤纸(12.5cm×12.5cm，100张/包) 100张
PVDF膜(进口分装),0.45μm,13.5cm×10cm,10张/包 1包
PVDF膜(进口分装),0.20μm,13.5cm×10cm,10张/包 1包
蛋白质银染检测试剂 40次
