商品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96743 |
商品介紹：
名稱(chēng) RKO-AS45-1 (結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞) 別稱(chēng)RKO-AS-45-1; RKOAS451; RKO_AS45 種屬人類(lèi) 年齡（性別）不詳 組織來(lái)源結(jié)腸癌，整合起動(dòng)GADD45a表達(dá)載體的CMV啟動(dòng)子 生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述人的cDNA中編碼GADD45的開(kāi)放閱讀框克隆到表達(dá)載體pCMV.3中，轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌細(xì)胞RKO，建立了RKO-AS45-1細(xì)胞株。RKO-AS45-1細(xì)胞含有穩(wěn)定整合巨細(xì)胞病毒(CMV)啟動(dòng)子的表達(dá)載體，RKO-AS45-1細(xì)胞系和它的母系RKO一起可用于GADD45對(duì)DNA修復(fù)、凋亡和藥物敏感性研究。 生物安全等級(jí)2 [Cells Contain CMV viral sequences] 生長(zhǎng)培養(yǎng)基MEM＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 基因表達(dá)情況p53+ (underexpressed) |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 CD150 / SLAM / SLAMF1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 SIRP alpha / CD172a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)
RKO-AS45-1 (結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞) 100mL Bis-Tris Propane,0.2M,pH6.5 Bis-Tris Propane,0.2M,pH6.5 常溫保存 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Somatotropin
2 ug pRNAi-Hys-H1 Lul/rxn pRNAi-Hys-H1 Lul/rxn 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 15.6-1000 pg/mL 大豆特定基因序列(Lectin)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?
10mg 氨甲喋呤 Amethopterin -20℃保存 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Pulmonary surfactant-associated protein A1
1.5mL 酵母tRNA溶液B（精提）(5mg/mL) Yeast tRNA Solution -20℃保存
霍亂弧菌成套生化鑒定管 21種*1套/盒*10盒 0.156-10 ng/mL 人MYC關(guān)聯(lián)因子X(jué)(MAX)ELISA試劑盒
亞硫酸鹽-素-瓊脂基礎(chǔ) Sulfite-Polymyxin-Sulphadiazine Agar Base 250g
50T 羊特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人抑制素β-B(Inhbb)ELISA試劑盒
2 mg 1400W（iNOS抑制劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Myeloblastin
UBA培養(yǎng)基 UBA Medium 250g 7.8-500 U/mL 人白介素2受體β亞基 (IL-2-RB)ELISA試劑盒
1%NaCl纖維二糖 20支 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human VPS10 domain-containing receptor SorCS1
2 ug pAHC-17X pAHC-17X 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
