活细胞核染料吖啶橙正在热销的产品：FOXO3A 叉头蛋白O3A抗体酰酮铪 97%
Phospho-FoxO3a (Ser318/321) 化叉头蛋白3A抗体酰酮铁 98%
Phospho-FoxO3a (Ser294) 叉头蛋白3A抗体酰酮锰 97%
Phospho-FoxO3a (Ser253) 化叉头蛋白3A抗体酰酮镍 95%
FOXO4 叉头蛋白O4抗体酰酮铂(II) 97%
Ph
产品介绍:
橙是一种荧光色素，其检测激发滤光片波长488nm。阻断滤光片波长515nm。它与细胞中DNA 和RNA 结合量存在差别，可发出不同颜色的荧光，与DNA 结合量少发绿色荧光，与RNA 结合量多发桔黄色或桔红色荧光。该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA 和RNA 染色。 在荧光显微镜下观察，橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光；而在凋亡细胞中，因染色质固缩或断裂为大小不等的片断，形成凋亡小体。橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色碎片颗粒；而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。橙AO 常与溴化乙啶EB 合用双染，因EB 只染死细胞使之产生桔黄色荧光，由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。 用于细胞核染色时，推荐的橙工作浓度为0.1%。一般孵育条件是室温避光15 分钟。由于不同细胞对橙的摄取能力不同，该法不一定适用所有细胞。 储存：-20℃，避光，有效期12月。 |
中文名称：活细胞核染料吖啶橙
英文名称：Acridine Orange；AO
产品规格：25mg
货号：FS-X9815
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
δ样蛋白1同源物(δLK1)英文名：δLK1 1号染色体开放阅读框177抗体包装1g
γ-内啡肽(γEP)英文名：γEP 1号染色体开放阅读框183抗体包装250mg
γ-谷酰转移1(γGT1)英文名：γGT1 克仑特罗/瘦肉精抗体包装25g
γ-基丁A受体α2(γABRα2)英文名：γABRα2 6号染色体开放阅读框151抗体包装5g
γ-基丁(γABA)英文名：γABA 15号染色体开放阅读框52抗体包装100mg
β-血小板球蛋白(βTG)英文名：βTG 2号染色体开放阅读框89抗体包装1g
β细胞(βTC)英文名：βTC BCL10结合蛋白和激活核转录因子抗体包装5g
β-位淀粉样前体蛋白裂解1(βACE1)英文名：βACE1 凋亡加强结构域蛋白15抗体包装25g
β-内啡肽(βEP)英文名：βEP 慢性淋巴白血病缺失基因6蛋白抗体包装5g
β-骨胶原交联(βCTx)英文名：βCTx 13号染色体开放阅读框38抗体包装25g
β2-微球蛋白(β2M)英文名：β2M 14号染色体开放阅读框140抗体包装5g
α-生育酚转运蛋白(TTPα)英文名：TTPα 阳离子转运调节样蛋白2抗体包装1g
α-乳清蛋白(αLA)英文名：αLA 15号染色体开放阅读框62抗体包装5g
α-内啡肽(αEP)英文名：αEP 15号染色体开放阅读框41抗体包装100g
α-骨胶原交联(αCTx)英文名：αCTx 环核阳离子通道蛋白α2抗体包装25g
苏云金芽胞杆菌Bacillus│thuringiensis 质量规格：>98%,BR,可用于培养异质性胞核核糖核蛋白K试剂盒异牡荆;Isovitexin with
暂无Pararhodobacter│aggregans 质量规格：HPLC>98%,标准品异质性胞核核糖核蛋白I试剂盒右旋龙脑;Borneol
香菇Lentinula│edodes 质量规格：>99%,BR,可用于培养异质性胞核核糖核蛋白H试剂盒油;cis-9-Octadecenoi
活细胞核染料吖啶橙氧化节杆 1-溴-4-正十二烷基苯C1q肿瘤坏死因子相关蛋白5
猴头 醋乌利司他蛋白激M2
马克斯克鲁维酵母 5-溴-2-苄氧基-6-磷酯Cε链
出芽短梗霉 磷三异丁酯狂犬病抗体
聚生壳 2-氨基-3,5-二氟膜辅蛋白
球孢白僵 4-苄基吗啉-2-甲α-乳白蛋白
酿酒酵母 2-(甲氧基)苯抗骨骼肌抗体
根瘤 3-甲酰氨基-3-苯基Ⅱ型胶原代谢产物C2C
松口蘑 6,6'-二溴-N,N'-(2-辛基十二烷基)-异靛蓝小而密低密度脂蛋白胆固
斑玉蕈 2-溴-3-氨基-6-snap-tag蛋白
酱油曲霉 2-溴-3-氨基-4-血小板衍化生长因子A
酿酒酵母 3-氨基-4-溴-2-CXC趋化因子受体5
虾苗杀虾微杆 4-乙氧基-2,3-二氟苯甲单纯疱疹病1IgG抗体
果生链核盘 Dowex? 50WX2-100离子交换树脂单纯疱疹病1IgM抗体
根瘤 4-溴甲基-2--频那酯水痘-带状疱疹病IgG抗体
