公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱:C4H肉桂酸4羥化酶檢測試劑盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63835
商品介紹:
測定意義 C4H又稱反式肉桂酸-4-單氧化酶,多存在于高等植物、酵母、菌類中,該酶催化肉桂酸羥化作用產(chǎn)生4-香豆鹽,是苯丙烷途徑中繼L-苯氨酸解氨酶之后的第二個關(guān)鍵酶。 測定原理: C4H催化肉桂酸和NADP生成4-香豆酸鹽和NADPH,在340nm下測定NADPH生成速率,即可反映C4H活性。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。 |
粗酶液提?。?/span>
1、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
EB病清道夫受體BEBV
磷化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3肽BPhospho-Stat3
HLAⅡ類組織相容性抗原,DPα1鏈抗菌肽HLA class II histocompatibility antigen, DP alpha 1 chain
主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類顆粒溶major histocompatibility complexⅡ
蘋果脫氫2富組蛋白Malate Dehydrogenase2
前列腺E合2球蛋白樣轉(zhuǎn)錄體受體Prostaglandin E Synthase 2
γ谷酰轉(zhuǎn)肽絲狀血球凝集gamma glutamyl transpeptidase
白細(xì)胞介6絨毛蛋白/埃茲蛋白Interleukin 6
透明質(zhì)嗜環(huán)蛋白/親環(huán)AHyaluronic acid
Ⅳ型膠原肌養(yǎng)蛋白Collagen TypeⅣ
磷烯式丙酮羧激膠原凝集phosphoenolpyruvate carboxykinase
果糖-1,6-二磷伴侶蛋白10Fructose-1,6-Bisphosphatase
葡萄糖-6-磷纖調(diào)蛋白Glucose-6-phosphatase, catalytic
糖原合成鈣網(wǎng)蛋白Glycogen synthase
趨化因子配體3網(wǎng)膜ELISA Kit for ChemokineLigand 3
C4H肉桂酸4羥化酶檢測試劑盒微量法乙鈉 98%穗花牡荊甙 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98% Anti-LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗體
硫代甜菜 12 98%桃葉珊瑚苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%Anti-Lysozyme 溶菌抗體
十二烷基硫鈉 97%,電泳白果內(nèi)酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%Anti-Lyn 膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體
十二烷基硫鈉 99.0%,超純級巴卡丁 III 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%Anti-Phospho-Lyn (Tyr507) 膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體
硫代甜菜 8 98%松果菊苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥95% Anti-Phospho-Lyn (Tyr396) 磷化膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體
硫代甜菜10 98%雪上一枝蒿甲 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%Anti-Phospho-Lyn (Tyr497) 磷化膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體
二甲藍(lán)FF 80%雪上一枝蒿乙 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%Anti-LYVE-1 管內(nèi)皮透明質(zhì)受體抗體
10.0μL微量進(jìn)樣器 尖頭菊苣 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%Anti-M2-PK/PKM2 酮激-M2抗體