ALK激酶抑制劑(CH5424802鹽酸鹽)正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：CTACK/CCL27(Human cutaneous T cell-attracting chemokine,CTACK) ELISA Kit 人皮膚T虜獲趨化因子混合 99%
BRAK/CXCL14(Human Breast and kidney expressed chemokine,BRAK) ELISA Kit 人胸腎表達(dá)趨
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
中文名稱(chēng)：ALK激酶抑制劑(CH5424802鹽酸鹽)
英文名稱(chēng)：CH5424802 Hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號(hào)：FS-X10693
產(chǎn)品介紹:
CH5424802鹽酸鹽是ALK激酶高效抑制劑，IC50值為1.9nM，對(duì)ALK突變型L1196M也敏感。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：1256589-74-8 別名：Alectinib Hydrochloride;AF-802 Hydrochloride;RG-7853 Hydrochloride;RO-5424802 Hydrochloride 純度：99.81% 分子量：519.08 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。 |
間型腐霉磷化鈣介質(zhì)抗原Anti-CAPN11 AntibodySnurportin1蛋白(SNUPN1)
羊泰勒蟲(chóng)（張家川株-2）神經(jīng)激肽A受體（多肽抗原）Anti-CAPN12 AntibodySnail同源物1(SNAI1)
大豆慢生根瘤菌鈣蛋白（多肽）Anti-CARD10 AntibodySmoothened蛋白(SMO)
秦氏蜜環(huán)菌炎癥負(fù)調(diào)控因子蛋白（抗原）Anti-CAPN9 AntibodySmoothelin蛋白(SMTN)
豌豆根瘤菌微管相關(guān)蛋白（抗原）Anti-CARD8 AntibodySmad同源物7(Smad7)
霍利斯格里蒙菌端粒（催化亞單位）（多肽抗原）Anti-CARD19 AntibodySmad同源物4(Smad4)
宇佐美曲霉轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–α（抗原）Anti-CARF AntibodySmad同源物3(Smad3)
掌狀花耳鈣/鈣調(diào)依賴(lài)蛋白激2α抗原Anti-CARF AntibodySmad同源物1(Smad1)
微小桿菌鈣/鈣調(diào)蛋白依賴(lài)蛋白激IG抗原Anti-CARM1 AntibodySlit同源物3(Slit3)
委內(nèi)瑞拉鏈霉菌轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β1（抗原）Anti-P4 AntibodySlit同源物2(Slit2)
節(jié)桿菌屬鈣/鈣調(diào)依賴(lài)蛋白激2b抗原Anti-P5 AntibodySlit同源物1(Slit1)
環(huán)狀芽胞桿菌Park7/DJ-1/CAP1抗原Anti-P7 AntibodySlingshot同源物3(SSH3)
稻平臍孺孢環(huán)化相關(guān)蛋白CAP-2抗原Anti-Z1 AntibodySlingshot同源物2(SSH2)
生脂固氮螺菌轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β2前體肽Anti-CAVIN3 AntibodySlingshot同源物1(SSH1)
枯草芽孢桿菌轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β3（抗原）Anti-P9 AntibodySideroflexin5蛋白(SFXN5)
植物乳桿菌植物亞種轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體2（多肽抗原）Anti-CBFA2T3 AntibodySideroflexin4蛋白(SFXN4)
PGBD3蛋白抗體Phaeobacterinhibens人成神經(jīng)細(xì)胞瘤（來(lái)自骨髓）
蛋白激Cα相互作用蛋白1抗體Fulvimarinapelagi大鼠肝癌細(xì)胞
絲/蘇蛋白激5抗體Aurantimonascoralicida人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞
蛋白質(zhì)磷1G抗體PP2CγPsychrobacillusinsolitus小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
ALK激酶抑制劑(CH5424802鹽酸鹽)大腸桿 4--3-活化
真姬菇 3-苯堿性磷
紫色鏈霉 吡咯-2-甲銅藍(lán)蛋白
費(fèi)希爾曲霉 2--4-甲基喹啉布病抗體
產(chǎn)氣莢膜梭 A型 1,2,3-氧基苯雷帕霉靶蛋白
蕓薹生鏈格孢 2--5-甲碳酐2
皺褶青霉 甲基三辛基化(R=C8-C10)硫代反應(yīng)物
耐多抗諾卡氏 鉍試劑II葡萄糖-6-磷脫氫
長(zhǎng)孢洛德酵母 2,3-二苯甲線(xiàn)粒體肌激1A
卷枝毛霉卷枝變型 四甲基脲碳酐2
安大略假絲酵母 四基化甘油-3-磷酰基轉(zhuǎn)移
泡盛曲霉 甲脒鹽鹽γ球蛋白
阿爾通山堿線(xiàn) (S)-2-(甲氧甲基)吡咯烷誘導(dǎo)型NO合
膠孢 (S)-(-)-2-(甲氧甲基)-1-吡咯烷甲環(huán)加氧2
食吡啶紅球 鈉亞洲 I 型口蹄疫病
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
