樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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產(chǎn)品名:尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)檢測試劑盒
英文名:uPA ELISA Kit
貨號:FS-E63571
尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)檢測試劑盒 英文名稱:uPA ELISA Kit 產(chǎn)品別名:小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒批發(fā)價,小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒廠價用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本,例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本
服務(wù):可提供免費代測服務(wù),以及產(chǎn)品說明書和技術(shù)指導(dǎo)等
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等
保存環(huán)境:2-8℃低溫、避光、防潮
產(chǎn)品優(yōu)勢:ELISA試劑為我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行,并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測,我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。
試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
注意事項
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2)實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9)按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
β,β-二甲基烯酰阿卡寧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Octanesulfonic acid, sodium salt產(chǎn)品別名: 3-(3-溴苯基)吡唑
β-桉葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium acetate, monohydrate產(chǎn)品別名: 2-氟肉桂
β-谷甾英文名稱: Calcium phosphate, tribasic產(chǎn)品別名: N-Boc-2-哌啶乙酸
β-胡蘿卜素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DL-Selenomethionine產(chǎn)品別名: 蒽醌-1,8-二磺酸二
β-欖香酮酸;β-嵐香酮酸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Melibiose產(chǎn)品別名: N-1-Boc-N-4-Cbz-2-哌甲酸
β-萘黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium oxalate產(chǎn)品別名: 三[2-對甲苯基吡啶-C2,N‘]銥(III)
β-石竹烯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium tungstate, dehydrate產(chǎn)品別名: 1-乙氧羰基吡咯烷-3-酮
β-香樹素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Succinic anhydride產(chǎn)品別名: 2-氯-3-氟-4-吡啶
β-乙酰氧基異戊酰阿卡寧英文名稱: Tween-60產(chǎn)品別名: 3-(4-甲基哌-1-基)苯
γ-氨基丁酸(GABA),標(biāo)準(zhǔn)品英文名稱: Zymosan A from Saccharomyces cerevisiae產(chǎn)品別名: 2-溴-5-酚
γ-倒捻子素英文名稱: Calcium sulfate, anhydrous產(chǎn)品別名: 血卟啉單甲
阿膠(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DCC, Dicyclohexylcarbodiimide產(chǎn)品別名: 多烯紫杉三水合物
尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)檢測試劑盒卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白96抗體 N-Methyliminodiacetic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD5抗體 Nitrilotriacetic Acid Disodium Salt 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(T)
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD6抗體 N-(2-Carboxyethyl)iminodiacetic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD6抗體 Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
周期通道和神經(jīng)分化蛋白1抗體 TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol] 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(T)
凝集蛋白家族10抗體(肝) Dimethylsulfonazo III 質(zhì)量規(guī)格:堿性稀土金屬用的分光光度試劑及硫酸根用鋇的沉淀滴定指示劑
銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 Sulfonazo III 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(HPLC)
COMM結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體 3sodium 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
Cordon bleu蛋白樣1抗體 2,2'-Dihydroxyazobenzene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)