實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
犬小孢子菌PCR熒光定量檢測試劑盒 | Microsporum canis PCR | 多種規(guī)格 | BJ-P6975 |
實驗外包:
1.基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構建
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 １．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。 ２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。 ３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。 ４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 ５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。 ６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。 ７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
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操作流程
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
50T 玉米GA21/MS PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA試劑盒
100mL SSC溶液,20× SSC, 20× 常溫
抗生素檢定培養(yǎng)基2號（高pH） Antibiotic Agar 2 250g 31.2-2000 pg/mL 人血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒
2 ug pYr-AdShuttle- 1 pYr-AdShuttle- 1 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人60kD熱休克蛋白(HSPD1)ELISA試劑盒
50T 節(jié)瘤擬桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
2 ug pE2F-TA-Luc pE2F-TA-Luc 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Transcobalamin-2
AHM鑒別培養(yǎng)基 AHM Medium 250g 78-5000 pg/mL 人原纖維蛋白2(Fibrillin-2)ELISA試劑盒
24 T 肌酸激測試劑盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存 78-5000 pg/mL 人纖維膠凝蛋白1(FCN1)ELISA試劑盒
膽汁液態(tài)培養(yǎng)基 Bile broth 250g 0.469-30 ng/mL ELISA Kit for Human Complement C1q subcomponent subunit C
2 ug pOTB7 HSPA1A pOTB7 HSPA1A 低溫運輸，-20℃保存 15.6-1000 pg/mL 人鈣調理蛋白1(Calponin-1)ELISA試劑盒
氯化鈉蔗糖瓊脂 Sodium Chloride Sucrose Agar 250g
犬小孢子菌PCR熒光定量檢測試劑盒Tenovin-1 SIRT1和SIRT2抑制劑（Tenovin-1） 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
LY 303511 hydrochloride mTOR抑制劑（LY 303511 hydrochloride） 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
PFK-015 PFKFB3抑制劑(PFK-015) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
CCT 137690 Aurora抑制劑（CCT 137690） 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Mutant IDH1 inhibitor 突變型IDH1R132H抑制劑（Mutant IDH1 inhibitor） 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
BIX02189 MEK5/ERK5抑制劑（BIX02189） 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
AZD8330 MEK1/2抑制劑（AZD8330） 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
LFM-A13 Btk激酶抑制劑(LFM-A13) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
TAK-901 Aurora A和B抑制劑(TAK-901) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
360A iodide G-四聯(lián)體結構抑制劑（360A iodide） 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
SC-514 IKK-2抑制劑（SC-514） 1mL(10mM)|10mg|50mg
