ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 叉頭框C2撫生ELISA試劑盒 |
英文名稱 | FOXC2 |
貨號(hào) | FS-P65098 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
殺菌肽B/天蠶抗菌肽B抗體產(chǎn)品別名:小鼠蛋白激酶Cα(PKCα)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),10-脫乙酰巴卡丁 III DEACETYLBACCATIN III, 10-(P)
碳酐酶13抗體產(chǎn)品別名:小鼠蛋白激酶Bγ(PKBγ)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),10-脫乙酰巴卡丁 III DEACETYLBACCATIN III, 10-(P)
離子通道蛋白5抗體產(chǎn)品別名:小鼠蛋白二化物異構(gòu)酶A4(PDIA4)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),10-脫乙酰巴卡丁 III DEACETYLBACCATIN III, 10-(P)
軸突相關(guān)粘附分子抗體產(chǎn)品別名:小鼠蛋白二化物異構(gòu)酶A2(PDIA2)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),10-脫乙酰巴卡丁 III DEACETYLBACCATIN III, 10-(P)
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD1抗體產(chǎn)品別名:小鼠蛋白Z(PROZ)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),DEACETYL-7-XYLOSYLTAXOL C, 10-(P)
ATP依賴的解旋酶CHD3抗體產(chǎn)品別名:小鼠蛋白C(PROC)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),DEACETYL-7-XYLOSYLCEPHALOMANNINE, 10-(SH)
碳酐酶7抗體產(chǎn)品別名:小鼠蛋氨腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅰα(MAT1α)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),DEACETYL-7-XYLOSYLCEPHALOMANNINE, 10-(SH)
膠原蛋白和鈣結(jié)合表皮生長(zhǎng)因子結(jié)構(gòu)域1抗體產(chǎn)品別名:小鼠彈性蛋白微原纖維界面因子2(EMILIN2)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),DEACETYL-7-XYLOSYLCEPHALOMANNINE, 10-(RG)
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白102B抗體產(chǎn)品別名:小鼠彈性蛋白酶4(ELA4)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),紫花前胡素 DECURSIN(SH)
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白16抗體產(chǎn)品別名:小鼠彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),紫花前胡素 DEACYLGYMNEMIC ACID(SH)
色素B還原酶1抗體產(chǎn)品別名:小鼠膽囊收縮素八肽(CCK8)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),紫花前胡素 DEACYLGYMNEMIC ACID(SH)
2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框76抗體產(chǎn)品別名:小鼠膽囊收縮素B受體(CCKBR)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),DEACETYLBACCATIN-III, 7-(triethylsil)-10-(RG)
3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框19抗體產(chǎn)品別名:小鼠膽囊收縮素A受體(CCKAR)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),DEACETYLBACCATIN-III, 7-(triethylsil)-10-(RG)
色素c氧化酶5A抗體產(chǎn)品別名:小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白5(MCP5)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),DEACETYLTAXOL C, 10-(RG)
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白60抗體產(chǎn)品別名:小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP3)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià),DEACETYLTAXOL C, 10-(RG)
叉頭框C2撫生ELISA試劑盒Human FBXW4(F-box and WD repeat domain containing 4) ELISA Kit短小芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus pumilus
Human FBXO18 ELISA KitVagococcus sp.拉丁屬名: Vagococcus sp.
Human FBXW5 ELISA Kit楊樹(shù)細(xì)盾霉用途: 植物病原物;用于該類群菌的系統(tǒng)學(xué)研究
Human FBXW7 ELISA Kit假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas japonica
Human FBXO22 ELISA Kit竹蓀屬拉丁屬名: Dictyophora sp.
Human FCHSD1 ELISA Kit球孢白僵菌用途: 鞘翅目天牛屬害蟲(chóng)生物防治
Human FCRLB ELISA Kit松生擬層孔菌拉丁屬名: Fomitopsis pinicola
Human FBXO28 ELISA Kit香菇7注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human FMNL1 ELISA Kit簡(jiǎn)青霉拉丁屬名: Penicillium simplicissimum
Human FMR1NB ELISA Kit土生叢毛單胞菌拉丁屬名: Comamonas terrigena
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)