一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(最好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱:馬爾太蟲通用PCR熒光定量檢測試劑盒
英文名稱:Marteilia spp.PCR
貨號:BJ-P6966
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)外包:
基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、使用方法:
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
1瓶 MDA-MB-435株 MDA-MB-435 低溫運(yùn)輸和保存抗生素2號培養(yǎng)基(PH7.8-8.0)進(jìn)口、國產(chǎn)Antibiotic Agar 2250克克林、林可等的效價測定
1mL 環(huán)A溶液,10mg/mL Cyclosporin A Solution -20℃避光保存 0.156-10 ng/mL 人NF-κ-B抑制劑β(NF-kappa-BIB)ELISA試劑盒
2 ug pCMV-MCS pCMV-MCS 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL. 牛特定基因序列(Bovine)核酸檢測試劑盒
R2A瓊脂 R2A Agar 250g
25g OPD 干粉 OPD,Powder 避光保存 15.6-1000 U/mL 人鞘氨醇激2(SPHK2)ELISA試劑盒
十六烷基瓊脂 Cetrimide Agar 250g 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Protein S100-A4
野生酵母培養(yǎng)基 250g 3.12-200 ng/mL 人線粒體氧化子亞基4同型1(Cytochrome c oxidase subunit 4 isoform 1,mitochondrial)ELISA試劑盒
10次 預(yù)染蛋白質(zhì)電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)(43-200 KD) Prestained Protein Marker -20℃保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human PWWP domain-containing protein MUM1
2 ug pEGFP- N3 pEGFP- N3 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人3-羥基-3-甲基戊二酰合1(HMGCS1)ELISA試劑盒
2 ug pPZp-RCS2-Bar pPZp-RCS2-Bar 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Cytokine receptor common subunit gamma
200 mL 小鼠淋巴分離液1.092 Cell Separation Solution -20℃保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Insulin-like growth factor-binding protein 2
馬爾太蟲通用PCR熒光定量檢測試劑盒HA15 BiP抑制劑(HA15) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
IMR-1 Notch抑制劑(IMR-1) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
LJI308 RSK抑制劑(LJI308) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
CHIR-99021 trihydrochloride GSK-3α/β抑制劑(CHIR-99021 trihydrochloride) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
Citarinostat HDAC6抑制劑(Citarinostat) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
HTH-01-015 NUAK1抑制劑(HTH-01-015) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
VBY-825 cathepsin可逆抑制劑(VBY-825) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
Marinopyrrole A Mcl-1抑制劑(Marinopyrrole A) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
BSI-201 PARP1抑制劑(BSI-201) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
GDC-0623 MEK1抑制劑(GDC-0623) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
GDC-0879 B-Raf抑制劑(GDC-0879) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg