操作流程
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
多態(tài)小小菌PCR熒光定量檢測試劑盒 | Mima polymorphaPCR | 多種規(guī)格 | BJ-P6983 |
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。 2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。 3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。 4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。 6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。 7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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酵母浸粉 Yeast Extract Powder 250g 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Dipeptidase 1
2 ug pPICZα GA pPICZα GA 低溫運輸,-20℃保存
1mL C溶液,5mg/mL Mitomycin Solution 4℃避光保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Telomerase reverse transcriptase
脫羧肉湯 20支 31.2-2000 pg/mL 人干擾素誘導的跨膜蛋白3(IFITM3)ELISA試劑盒
50mL 內毒素清除專用親和介質 Endotoxin Removal Resin 4℃保存 6.25-400 ng/mL 人血紅蛋白γ-1亞基(HBG1)ELISA試劑盒
100mL CAPS Buffer,0.5M,pH10.5 CAPS Buffer,0.5M,pH10.5 常溫保存
2 ug pFB-HTB pFB-HTB 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 馬流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)
2 ug pET-41a(+) pET-41a(+) 低溫運輸,-20℃保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Corticotropin-releasing factor receptor 1
50T 解脲脲原體PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Proline-rich acidic protein 1
采樣吸收液1-GVPC液體培養(yǎng)基 GVPC Liquid Medium 100g 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human DNA replication factor Cdt1
100次 總抗氧化能力檢測試劑盒(FRAP法) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Actin, alpha skeletal muscle
多態(tài)小小菌PCR熒光定量檢測試劑盒USP7-IN-1 USP7小分子抑制劑(USP7-IN-1) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
ID-8 DYRK抑制劑(ID-8) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
GZD824 Bcr-Abl野生型和T315I突變型抑制劑(GZD824) 1mL(10mM)|5mg|10mg
Ellagic acid CK2抑制劑(Ellagic acid) 1g|5g
Rolapitant neurokininNK1受體抑制劑(Rolapitant) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
CP-724714 HER2/ErbB2抑制劑(CP-724714) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
YK-4-279 RHA與EWS-FLI1結合抑制劑(YK-4-279) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
TCS-PIM-1-4a Pim抑制劑(TCS-PIM-1-4a) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
Exemestane 芳香酶(aromatase)抑制劑(Exemestane) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
PHA-680632 Aurora A/Aurora B和Aurora C抑制劑(PHA-680632) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Inauhzin SIRT1抑制劑(Inauhzin) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg