操作流程
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
納米小孢子菌PCR熒光定量檢測試劑盒 | Microsporum nanumPCR | 多種規(guī)格 | BJ-P6977 |
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。 2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。 3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。 4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。 6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。 7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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2 ug pVL1393 pVL1393 低溫運輸,-20℃保存
1瓶 NCI-H2087株 NCI-H2087 低溫運輸和保存 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Inositol monophosphatase 1
梭菌強化培養(yǎng)基 Reinforced medium for clostridia 250g 0.625-40 ng/mL 無形體核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
1瓶 A-673株 A-673 低溫運輸和保存 1.56-100 mIU/L ELISA Kit for Human Insulin
250mL Tris-Acetate Buffer,1M,pH7.0 Tris-Acetate Buffer,1M,pH7.0 常溫保存 1.56-100 ng/mL 人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒
100g 酸性品紅 Fuchsin Acid 室溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Granulysin
10L Tricine-SDS-PAGE陽極電泳液(干粉) Tricine-SDS-PAGE Cathod Buffer 常溫保存 0.312-20 ng/mL 人蛋白活化受體4(PAR-4)ELISA試劑盒
1mL APMSF溶液,10mg/mL APMSF Solution -20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Endothelial cell-specific molecule 1
25g QAE 葡聚糖凝膠 A-50 QAE-Sephadex A-50 室溫保存 0.156-10 ng/mL 人熱休克因子4 (hHSF4)ELISA試劑盒
OF生化管 20支
500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH3.0 Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH3.0 常溫保存 0.156-10 ng/mL 人質(zhì)組氨酰(Histidyl-tRNA synthetase, cytoplasmic) ELISA試劑盒
納米小孢子菌PCR熒光定量檢測試劑盒PU-WS13 Hsp90抑制劑(PU-WS13) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
KDM5-IN-1 KDM5抑制劑(KDM5-IN-1) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
ON123300 CDK4抑制劑(ON123300) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
K-Ras(G12C) inhibitor 12 K-Ras(G12C)抑制劑(K-Ras(G12C) inhibitor 12) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
Dovitinib lactate FGFR3抑制劑(Dovitinib lactate) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
PF-AKT400 Akt抑制劑(PF-AKT400) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
LJH685 RSK抑制劑(LJH685) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
NSC305787 hydrochloride PKC抑制劑(NSC305787 hydrochloride) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
SGC2085 CARM1抑制劑(SGC2085) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
ReACp53 p53amyloid formation抑制劑(ReACp53) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg
ML241 hydrochloride p97ATPase抑制劑(ML241 hydrochloride) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg