特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
小鼠乳腺瘤病毒PCR熒光定量檢測試劑盒 | Mouse Mammary Tumor Virus(MMTV)RTPCR | 多種規(guī)格 | BJ-P6997 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。 2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。 3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。 4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。 6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。 7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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操作流程
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
125mL Sodium Acetate Solution(乙酸鈉溶液),3M,pH4.5 Sodium Acetate Solution,3M,pH4.5 常溫保存
50次 DNA電泳分子量標準(λ DNA/HindIII) DNAMETER(3) 4℃保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Carbonic anhydrase 1
1500 U 限制性內切EcoRV Restriction Endonuclease -20℃保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Calponin-1
2 ug pTYB 11 pTYB 11 低溫運輸,-20℃保存 62.5-4000 pg/mL 人層粘連蛋白γ2(LAMγ2)ELISA試劑盒
2mL Protein A+G瓊脂糖 Protein A+G Agarose 4℃保存 0.312-20 ng/mL 人醛酮還原1-B10(Aldo-keto reductase family 1 member B10)ELISA試劑盒
25g L- 蘇 L-Threonine 室溫干燥保存 2.5-160 ng/mL 人叉頭蛋白P3(FOXP3)ELISA試劑盒
1瓶 DMF7株 DMF7 低溫運輸和保存堿性L-G培養(yǎng)基基礎進口、國產Alkaline L-G medium Base適用于酸性物質處理的結核桿菌標本250
5 mg AG 490 (JAK抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
SS瓊脂顆粒 SS Agar 300ml/袋*10 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Histidyl-tRNA synthetase, cytoplasmic
2 ug pT7TS pT7TS 低溫運輸,-20℃保存 15.6-1000 pg/mL 人白介素11(IL-11)ELISA試劑盒
30次 一站式Tricine-SDS-PAGE套裝 One-Stop Tricine-SDS-PAGE Pack 常溫保存(上樣液需要-20℃保存) 62.5-4000 pg/mL ELISA Kit for Human Teratocarcinoma-derived growth factor 1
小鼠乳腺瘤病毒PCR熒光定量檢測試劑盒Flumatinib 多種激酶抑制劑(Flumatinib) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
Bexagliflozin SGLT2抑制劑(Bexagliflozin) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
S49076 MET/AXL/MER和FGFR1/2/3抑制劑(S49076) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
(-)-p-Bromotetramisole oxalate 堿性磷酸酶抑制劑((-)-p-Bromotetramisole oxalate) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg
A-196 SUV420H1和SUV420H2化學抑制劑(A-196) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
CPI-637 CBP/EP300bromodomains抑制劑(CPI-637) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
ML240 p97抑制劑(ML240) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
Tenalisib PI3Kδ和PI3Kγ抑制劑(Tenalisib) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
PF-04929113 Hsp90抑制劑(PF-04929113) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
1-Naphthyl PP1 hydrochloride src家族抑制劑(1-Naphthyl PP1 hydrochloride) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
CZ415 mTOR抑制劑(CZ415) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg