培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96659 |
商品介紹:
名稱 H22 (小鼠肝癌細胞) 別稱Hepatoma-22; Hepatoma 22 種屬小鼠 年齡(性別)不詳 組織來源肝;肝癌 生長特性懸浮細胞 細胞形態(tài)淋巴母細胞樣 背景描述H22細胞是分離自小鼠腹水,由大連醫(yī)科學院建立。 生長培養(yǎng)基RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例3×10^5-5×10^5cells/mL 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 注意事項該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液。 |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神經(jīng) (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 KIAA1279 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 BRCA2 / BCCIP 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 PILR-alpha / PILRA 人細胞裂解液 (陽性對照)
H22 (小鼠肝癌細胞) 120次 酸性檢測試劑盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存卵黃培養(yǎng)基基礎進口、國產(chǎn)Egg-Yolk Mannitol Salt agar Base用于菌的分離培養(yǎng)(Japan方法)250
營養(yǎng)鹽瓊脂(AATCC30) Nutrient-salts Agar 250g
100mL HEPPSO Buffer,0.2M,pH7.0 HEPPSO Buffer,0.2M,pH7.0 常溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 1
50mL Potassium Acetate Solution(乙酸鉀溶液),1M Potassium Acetate Solution,1M 常溫保存
三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基 Triple SugarIronAgar Medium 250g 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Nesfatin-1
10次 克必隆eTS RNA熒光探針制備試劑盒 0.156-10 ng/mL 人高遷移率族蛋白HMGI-C( High mobility group protein HMGI-C) ELISA試劑盒
大豆酪蛋白消化物培養(yǎng)基(USP)顆粒 Soybean Casein Digest Medium 250g無脂肪奶粉進口、國產(chǎn)Nonfat-Dried Milk250克蛋白組級
2 ug pcDNA3.1 tdTomato pcDNA3.1 tdTomato 低溫運輸,-20℃保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Chorionic somatomammotropin hormone
10次 百萬堿基級動物DNAout 0.312-20 ng/mL 人線粒體天冬谷載體同工型2(ARALAR2/SLC25A13)ELISA試劑盒
2 ug pShuttle-IRES-hrGFP-2 pShuttle-IRES-hrGFP-2 低溫運輸,-20℃保存
1瓶 K562株 K562 低溫運輸和保存 0.125-8 ng/mL 人核受體輔助抑制因子2(NCOR2)ELISA試劑盒