一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(最好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱:海魚(yú)分枝桿菌PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Mycobacterium marinumPCR
貨號(hào):BJ-P7018
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)外包:
基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、使用方法:
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
1瓶 L6株 L6 低溫運(yùn)輸和保存 78-5000 pg/mL 人α-1(Alpha-amylase 1)ELISA試劑盒
100mL Bis-Tris Buffer,0.2M,pH6.0 Bis-Tris Buffer,0.2M,pH6.0 常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B
4次 大提柱式動(dòng)物DNAout Maxi Column Animal DNAOUT 常溫 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Caldesmon
PBS-Tween20洗液 PBS-Tween20 lotion 250g 0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Putative macrophage-stimulating protein MSTP9
50次 柱式病毒RNAout 78-5000 pg/mL 人活化Ⅻa(FⅫa)ELISA試劑盒
乙基紫疊氮鈉肉湯(litsky肉湯) 250g膽硫乳瓊脂(DHL) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose Agar腸道菌選擇性培養(yǎng)基,特別是沙門(mén)氏菌的選擇性分離(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))250
250mL Veronal Buffered Saline VBS Veronal Buffered Saline VBS 常溫保存
100g 三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷鹽酸鹽 TRIS-HCl(Tris(Hydroxymethyl)Aminomethane Hydrochloride) 室溫干燥保存BGS 瓊脂進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)BGS Agar用于沙門(mén)氏菌的分離培養(yǎng)(USDA-FSIS方法)250
25g 十六烷基基 CTAB(Cetyltrimethylammonium Bromide) 室溫干燥保存需氣菌厭氣菌培養(yǎng)基進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Thioglycollate Medium250克用于培養(yǎng)需氧菌、微需氧菌和厭氧菌
MMO-MUG培養(yǎng)基 250g
7.5%氯化鈉肉湯培養(yǎng)基(2015藥典) 250g 78-5000 pg/mL 人Ras激抑制劑2(KSR2)ELISA試劑盒
海魚(yú)分枝桿菌PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒JK184 Hedgehog(Hh)抑制劑(JK184) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
AU1235 結(jié)核分枝桿菌金剛烷脲尿素抑制劑(AU1235) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
2OH-BNPP1 BUB1kinase抑制劑(2OH-BNPP1) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
MN-64 tankyrases抑制劑(MN-64) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Akt1 and Akt2-IN-1 Akt1變構(gòu)抑制劑(Akt1 and Akt2-IN-1) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
R162 GDH1抑制劑(R162) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
ALK inhibitor 2 ALK抑制劑(ALK inhibitor 2) 1mL(10mM)|5mg|10mg
ITSA-1 HDAC抑制劑(ITSA-1) 1mL(10mM)|10mg|25mg|50mg|100mg
Compound 401 DNA-PK抑制劑(Compound 401) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
MRK-016 GABAAα5受體苯二氮激動(dòng)劑(MRK-016) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
Salermide Sirt1andSirt2抑制劑(Salermide) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg