培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96911 |
商品介紹:
名稱 HL-1 (小鼠心肌細胞) 別稱HL1 年齡(性別)雌 生長特性貼壁細胞 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 背景描述HL-1 Cardiac Muscle Cell Line is an immortalized mouse cardiomyocyte cell line able to continuously divide and spontaneously contract while maintaining a differentiated cardiac phenotype. HL-1 can be serially passaged without losing its differentiated cardiac myocyte phenotype, including morphological, biochemical, and electrophysiological properties. HL-1 is used in a variety of model systems to address questions of cardiac biology at the cellular & molecular levels. 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基MEM+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:4-1:6 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
小鼠 DNAM-1 / CD226 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 CDH12 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 EphrinB1 / EFNB1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IL13Ra1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 PD1 /
HL-1 (小鼠心肌細胞)100mL TB Solution-III TB Solution-III 常溫保存 0.625-40 ng/mL 人上皮粘附分子(EPCAM)ELISA試劑盒
10次 大提柱式質(zhì)粒 DNAout Maxi Column Plasmid DNAOUT 常溫保存(RNase A溶液4℃保存)
100mL DNSarkosyl溶液,10% 0.156-10 ng/mL 人低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒
2 ug pACYC177 pACYC177 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 白受體FcRn的大亞基p51(FcRn)ELISA試劑盒
500mL Acrylamide: Bis-acrylamide Solution(丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液),37.5:1 Acrylamide: Bis-acrylamide Solution,37.5:1 常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Programmed cell death protein 4
500U 天冬轉(zhuǎn)氨 Aspartate Aminotransferase -20℃保存 0.624-40 ng/mL ELISA Kit for Human Vitamin D3 receptor
1瓶 L7912株 L7912 低溫運輸和保存
1 管 Stbl3大腸桿菌 Stbl3 E.coli Strain -80℃保存 0.312-20 ug/mL ELISA Kit for Human Immunoglobulin A
2 ug pKK 233-3 pKK 233-3 低溫運輸,-20℃保存 78-5000 pg/mL 環(huán)腺苷(cAMP)ELISA試劑盒
營養(yǎng)肉湯管(含棉簽) 10ml*20支/包
2 ug pVAST pVAST 低溫運輸,-20℃保存 1.56-100 ng/mL 人促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素受體2(CRF-R2)ELISA試劑盒