一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(最好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱:諾如病毒型PCR熒光定量檢測試劑盒
英文名稱:Norwalk Viruses G1 (NV1)G1RTPCR
貨號:BJ-P7080
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗外包:
基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、使用方法:
實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
30次 低pH 緩沖液套裝 Low pH Buffer Set 常溫保存(5×低pH上樣液需要-20℃保存) 0.312-20 ng/mL 木瓜特定基因序列(Papaya)核酸檢測試劑盒
膽硫乳瓊脂(DHL) Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose Agar 250g 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Angiotensin II
2 ug pcDNA3-YFP pcDNA3-YFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.78-50 ng/mL 人基質(zhì)衍生因子1(SDF-1)ELISA試劑盒
2 ug pISRE-TA-Luc pISRE-TA-Luc 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
含90ml鹽緩沖液均質(zhì)袋 Phosphate Buffered Saline 10個/包 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human IgG receptor FcRn large subunit p51
麥康凱瓊脂3號 Maconkey Agar 3 250g
溶血(0.1%)赫氏瓊脂 Hottinger's Agar 250g
1000U 核酸內(nèi)切 IV Endonuclease IV -20℃保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Ovostatin homolog 1
100mL HEPES Buffer,0.5M,pH9.0 HEPES Buffer,0.5M,pH9.0 常溫保存 62.5-4000 pg/mL 人白介素15受體亞基alpha (IL15RA)ELISA試劑盒
50mg β-D- 阿糖胞苷 Cytosine β-D-Arabinofuranoside 4℃保存 0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Collagen alpha-1(II) chain
2 ug pcDNA3.1/Myc-His (-)B pcDNA3.1/Myc-His (-)B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
諾如病毒型PCR熒光定量檢測試劑盒Daclatasvir HCV NS5A抑制劑(Daclatasvir) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
Dolutegravir HIV-1整合酶抑制劑(Dolutegravir) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
GC376 3CLpro抑制劑(GC376) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg
Simeprevir HCV NS3/4A protease抑制劑(Simeprevir) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
Avibactam sodium β-lactamase抑制劑(Avibactam sodium) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
Anisomycin SAPKs/JNKs激活劑(Anisomycin) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
Oseltamivir acid influenza A和B病毒神經(jīng)酶抑制劑(Oseltamivir acid) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
Doxycycline hyclate MMP抑制劑(Doxycycline hyclate) 1mL(10mM)|1g|5g|10g
Asunaprevir HCV NS3protease抑制劑(Asunaprevir) 1mL(10mM)|1mg|2mg|5mg|10mg|50mg
Cycloheximide 蛋白和RNA合成抑制劑(Cycloheximide) 1mL(10mM)|200mg|500mg|1g|5g
Iopanoic acid 5-Deiodinase抑制劑(Iopanoic acid) 1mL(10mM)|100mg