產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
微量法 | 100管/96樣 | BJ-01S10183 |
商品介紹:
測定意義:
核酮糖-1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶(Rubisco, EC 4.1.1.39)是植物光合作用中的一個關(guān)鍵酶,既控制著CO2的固定,同時又制約著碳素向Calvin循環(huán)和光呼吸循環(huán)分流,其活性的大小直接影響著光合速率。
測定原理:
(1)在Rubisco的催化下,1分子的核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)與1分子的CO2結(jié)合,產(chǎn)生2分子的3-磷酸甘油酸(PGA);(2)PGA可通過外加的3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脫氫酶的作用,產(chǎn)生甘油醛-3-磷酸,伴隨著NADH氧化生成NAD+;(3)在340 nm NADH有特征吸收峰,而NAD+沒有此吸收峰,因此測定340nm吸光度下降速率可以代表Rubisco的羧化酶活性。
需自備的儀器和用品:
可見-紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
小鼠 SLITRK1 基因全長ORF克隆
小鼠 LRIG1 基因全長ORF克隆
小鼠 Integrin alpha1 基因全長ORF克隆
小鼠 HHIP 基因全長ORF克隆
小鼠 FZD4 基因全長ORF克隆
小鼠 CCL11 基因全長ORF克隆
小鼠 SERPINA3G 基因全長ORF克隆
小鼠 SERPINA3C 基因全長ORF克隆
小鼠 SERPINB6A 基因全長ORF克隆
小鼠 TPO R 基因全長ORF克隆
二磷酸核酮糖羧化酶測試盒100管/96樣大鼠半胱蛋白抑制劑/胱抑素C(Cys-C)免疫試劑盒進口、組裝
大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)免疫試劑盒進口、分裝
大鼠白血病抑制因子(LIF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
大鼠白細胞抗原DR(HLA-DR)免疫試劑盒*直銷
大鼠白細胞活化黏附因子(ALCAM)免疫試劑盒進口、組裝
大鼠白三烯E4(LTE4)免疫試劑盒進口、分裝
大鼠白三烯D4(LTD4)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
大鼠白三烯C4(LTC4)免疫試劑盒*直銷
大鼠白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒進口、組裝
大鼠白介素9(IL-9)免疫試劑盒進口、分裝
大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。