15min高產(chǎn)全血基因組DNA提取試劑盒

商品屬性：

商品介紹：

描述：該試劑盒采用的裂解液，可快速可靠的從抗凝全血樣本中純化出高純度的基因組 DNA，最大限度的去除蛋白、色素、脂類等雜質(zhì)污染。應(yīng)用本試劑盒獲取的 DNA純度高，無(wú)抑制劑，A260/A280 為 1.6-1.9。應(yīng)用本試劑盒提取的 DNA 可直接用于限制性酶切反應(yīng)、PCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern 雜交等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)：
（1） 本試劑盒中的 Washing Buffer 中已經(jīng)加乙醇，無(wú)需單獨(dú)添加。
（2）gDNA LB1，儲(chǔ)存時(shí)可能會(huì)有白色結(jié)晶沉淀，放置于56℃水浴鍋溶解后，不影響使用效果。
（3）蛋白酶 K（20 mg/ml）長(zhǎng)期保存請(qǐng)儲(chǔ)存于-20℃，短期室溫保存（6 個(gè)月），其它組分儲(chǔ)存于室溫。
（4）該試劑盒的保質(zhì)期為 2 年。
操作方法
（1）樣本處理（1.5 或 2 ml EP 管中處理）人抗凝全血：吸取 0.2~0.8 ml 抗凝全血加入到 800 μl 紅細(xì)胞裂解液中上下顛倒混合均勻，13000rpm 離心 30s，去上清，留白細(xì)胞沉淀，用 50 μl 水重懸白細(xì)胞沉淀（有少量紅細(xì)胞殘留并不影響 DNA 的產(chǎn)量，如仍然有大量紅細(xì)胞未裂解，可再次用紅細(xì)胞裂解液將紅細(xì)胞裂解）。淋巴細(xì)胞分離液分離出的白細(xì)胞：直接吸取 50~80 μl 白細(xì)胞。有核紅細(xì)胞抗凝全血（禽血）：吸取 10 μl 抗凝全血加入到50 μl 無(wú)菌水中，漩渦震蕩混合均勻。
（2）向上述準(zhǔn)備好的樣品溶液中加入 100 μl gDNA LB1 和20 μl 蛋白酶 K 漩渦混合均勻 10s，56℃水浴鍋中消化5~30min（長(zhǎng)時(shí)間消化可提高 DNA 的產(chǎn)量）。
（3）加入 700 μl gDNA BB2 漩渦震蕩混合均勻 1min，肉眼觀察有無(wú)未溶解的血凝塊，如果無(wú)血凝塊，則直接倒入到吸附柱中，13000rpm 離心 1min。注意：如果有未溶解的血凝塊，則短離心去除血凝塊后，再倒入到吸附柱中，進(jìn)行后續(xù)離心操作。
（5）倒掉廢液，向吸附柱中加入 500 μl Washing Buffer，13000rpm 離心 15s。重復(fù)此步驟一次。
（6）將吸附柱重新放回離心機(jī)，13000rpm 空離心 2min，將殘留的乙醇甩干。
（7）將吸附柱芯放入到 1.5ml 收集管中，向吸附柱芯中加入 60~150 μl DNA Elution Buffer（DNA Elution Buffer 預(yù)熱到 65℃將提高洗脫產(chǎn)量），室溫放置 1min，13,000rpm 離心1min，洗脫液即為基因組 DNA，冷凍保存。
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