操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
可見(jiàn)分光光度法 | 50管/24樣 | BJ-01S9965 |
商品介紹:
測(cè)定意義:
NAG是溶酶體中的一種酸性水解酶,廣泛存在于各種組織、體液和細(xì)胞中,以前列腺和腎近曲小管細(xì)胞內(nèi)含量最高。NAG活性變化與機(jī)體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。
測(cè)定原理:
NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成對(duì)-硝基,后者在400nm有最大吸收峰,通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算NAG活性。
自備用品:
酶標(biāo)儀/可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板/1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
人 CRP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 CDH13 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 RGS17 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 NAT2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 STX6 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 Carboxypeptidase M 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 CHI3L1 / YKL40 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 OSMR / IL-31RB 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 AGO1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
人 DNMT2 / TRDMT1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
N乙酰βD葡萄糖苷酶測(cè)試盒50管/24樣人T細(xì)胞表面糖蛋白CD1a(CD1A)免疫試劑盒*直銷(xiāo)
人T淋巴細(xì)胞白血病病毒Ⅰ/II(HTLV-Ⅰ/II)抗體免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
人TU3A蛋白(TU3A)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
人Trem樣轉(zhuǎn)錄因子1(TREML1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
人Traf2結(jié)合蛋白(T2BP)免疫試劑盒*直銷(xiāo)
人Toll作用蛋白(TOLLIP)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
人Toll樣受體7(TLR7)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
人Toll樣受體6(TLR6)免疫試劑盒*直銷(xiāo)
人Toll樣受體5(TLR5)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
人Toll樣受體4(TLR4)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝