培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96947 |
商品介紹:
名稱 RG2 (D74)(大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 別稱RG-2; Rat Glioma-2; D74; D74-RG2 種屬大鼠 年齡(性別)胚胎, 孕20天 組織來源腦部 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 背景描述This cell line may be used for both in vitro and in vivo studies of a rat brain tumor. It grows well in cell culture and provides a simple, reproducible glioma model when inoculated into the brains of syngeneic rats.The RG2 and F98 (ATCC CRL-2397) gliomas can be used as rat brain tumor models in experimental neuro-oncology. 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基DMEM+10%FBS+1%P/S 推薦傳代比例1:4-1:8 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
人 DPPII 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 DLL4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 DKK1 / Dkk-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 Decorin / DCN / SLRR1B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 DDR2 Kinase / CD167b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 CD209 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 DAN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 Cystatin-F / CST7 / Cystatin
RG2 (D74)(大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5mL 成纖維生長因子-不含動物成分 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存 0.312-20 ng/mL 人解整合素樣金屬蛋白10(ADAM10)ELISA試劑盒
0.5 mg LPS (TLR4激活劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存WORT瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)WORT Agar250克用于真菌,特別是酵母菌的計(jì)數(shù)和增菌培養(yǎng)
50T 水痘帶狀皰疹病毒PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Vasoactive intestinal polypeptide receptor 2
25g 葡聚糖凝膠 G-75 中顆粒 Sephadex G-75 Medium 室溫保存 0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Gremlin-1
250mL Citrate Buffer(檸檬酸鹽緩沖液),0.5M,pH5.5 Citrate Buffer,0.5M,pH5.5 常溫保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Ceramide kinase
25mg 刀豆蛋白 A IV Con A Type IV -20℃保存液體乳糖培養(yǎng)基進(jìn)口、國產(chǎn)Lactose Medium250克用于食品中沙門氏菌檢驗(yàn)前增菌培養(yǎng)
營養(yǎng)肉汁瓊脂 250g 0.156-10 ng/mL 人G蛋白信號10調(diào)節(jié)物(RGS-10)ELISA試劑盒
100次 轉(zhuǎn)ESPES-Nos 基因植物PCR Mix (36S-EPSES-Nos 基因) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存TSA 瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)TSA agar用于奶粉中坂崎桿菌的純化培養(yǎng)(FDA方法)250
麥康凱瓊脂(MAC) MaConkey Agar 250g 78-5000 pg/mL 人中期因子(MK)ELISA試劑盒
2 ug pMA09-H pMA09-H 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 12.5-800 ng/mL ELISA Kit for Human HDL-cholesterol
1 mg Forskolin(腺苷酸環(huán)化激活劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 0.312-20 ng/mL 人腫瘤壞死因子受體超族成員13B ELISA試劑盒