一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(最好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱:巴斯德氏桿菌屬通用PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Pasteurella spp.PCR
貨號(hào):BJ-P7124
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)外包:
基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、使用方法:
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲(chǔ)存條件:-20℃以下,有效期12個(gè)月。
50次 DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)(φX174 DNA/HaeⅢ) DNAMETER(3) 4℃保存 78-5000 pg/mL 人腫瘤壞死因子配體超家族成員14(TNFSF14)ELISA試劑盒
10mL 戊二醛,25% 水溶液 Glutaraldehyde Solution 室溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human L-dopachrome tautomerase
脫纖維羊血 Off fiber sheep blood 50ml
2 ug pCMV-Tet 3G pCMV-Tet 3G 低溫運(yùn)輸,-20℃保存MCP瓊脂進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)MCP Agar用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)(Acumedia 方法)250
50T 漢坦病毒Ⅱ型PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒(PERV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)
平板計(jì)數(shù)瓊脂(含麥芽提取物) Plate Count Agar 250g 15.6-1000 pg/mL 人Myc原癌基因蛋白(MYC)ELISA試劑盒
50套 微型離心管專用研磨杵 (有離心管) Microtube Pestle 常溫 0.156-10 ng/mL 人基質(zhì)金屬蛋白16(MMP-16)ELISA試劑盒
2 ug pLVPTH2-tTR-KRAB-Cerulean-scrambled_shRNA_2 (1837 ng) pLVPTH2-tTR-KRAB-Cerulean-scrambled_shRNA_2 (1837 ng) 低溫運(yùn)輸,-20℃保存YPD肉湯進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Yeast Extract Peptone Dextrose Broth250克BR
菌種和底層瓊脂培養(yǎng)基 Medium I(foe Seed and Basal Layer) 250g
10mg 植物血球凝集素 M PHA-M(Phytohemagglutinin M) 4℃保存
100mg Dexamethasone 4℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Neurturin
巴斯德氏桿菌屬通用PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒Gestrinone 平滑肌瘤抑制劑(Gestrinone) 1mL(10mM)|5mg|10mg
Lusutrombopag 血小板生成素受體激動(dòng)劑(Lusutrombopag) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
IKK-IN-1 IKK抑制劑(IKK-IN-1) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
N6-(2-Phenylethyl)adenosine A1腺苷受體激動(dòng)劑 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
Glafenine hydrochloride ABCG2抑制劑(Glafenine hydrochloride) 1mL(10mM)|100mg
Olodaterol β2-adrenoceptor激動(dòng)劑(Olodaterol) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
Peptide 401 血管通透抑制劑(Peptide 401) 1mL(10mM)|500ug|1mg|5mg
DprE1-IN-1 DprE1抑制劑(DprE1-IN-1) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
Scopoletin NF-κB和p38MAPK抑制劑(Scopoletin) 1mL(10mM)|50mg|100mg|200mg
INF39 NLRP3抑制劑(INF39) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
AN3199 PDE4抑制劑(AN3199) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg