我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，超低比價(jià)，貨期短，價(jià)格優(yōu)，售后齊全。
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號(hào) | BJ-X96638 |
商品屬性：
名稱 BC3H1 (小鼠腦瘤細(xì)胞) 別稱BC3H1; BC3H-1; BC-3H-1; BC-3-H-I 組織來源腦組織 生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)多角形 背景描述BC3H1細(xì)胞來源于小鼠平滑肌樣腫瘤組織；BC3H1細(xì)胞可產(chǎn)生腺苷酸磷酸激酶和肌酸磷酸激酶，表達(dá)乙酰受體和H-2K，類似骨骼肌細(xì)胞分化停滯的狀態(tài)，而非平滑肌細(xì)胞；BC3H1細(xì)胞鼠痘病毒陰性。 生長(zhǎng)培養(yǎng)基DMEM＋20% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時(shí)間~70 hours 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
人 P4HB ELISA配對(duì)抗體
小鼠 Fetuin-A / AHSG ELISA配對(duì)抗體
人 LAMP-1 / CD107a / LAMP1 ELISA配對(duì)抗體
人 KNG1 / Kininogen 1 ELISA配對(duì)抗體
甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配對(duì)抗體
人 NBL1 / DAND1 / DAN ELISA配對(duì)抗體
人 CHL-1 ELISA配對(duì)抗體
人 CD83 ELISA配對(duì)抗體
小鼠 PI
BC3H1 (小鼠腦瘤細(xì)胞)改良克氏雙糖鐵培養(yǎng)基管 5ml*20支麥迪、麥白檢定培養(yǎng)基進(jìn)口、國產(chǎn)Medecamycin Medium250克麥迪、麥白效價(jià)測(cè)定用
營養(yǎng)瓊脂（瓊脂20g） Nutrient Agar（Agar 20g） 250g溶脲支原體快速培養(yǎng)基進(jìn)口、國產(chǎn)UU Medium1人份/1支BR
20次 中草藥DNAout Herbal DNAOUT 常溫 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Myelin-associated glycoprotein
2 ug pX260-U6-DR-BB-DR-Cbh-NLS-hSp-Cas9-NSL-H1-shortract-PGK-puro pX260-U6-DR-BB-DR-Cbh-NLS-hSp-Cas9-NSL-H1-shortract-PGK-puro 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 7.8-500 ng/mL 人E3泛素蛋白連接CBL-B(E3 ubiquitin-protein ligase CBL-B)ELISA試劑盒
50次 T7體外轉(zhuǎn)錄試劑盒 T7 in vitro Transcription Kit -20℃保存
200U ATP依賴的DNase ATP Dependent DNase -20℃保存 0.78-50 ng/mL 人磷脂酰肌醇PTPRQ(Phosphotidylinositol phosphatase PTPRQ)ELISA試劑盒
2 ug pLenti4/V5-DEST pLenti4/V5-DEST 低溫運(yùn)輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人基底粘附分子(Basal cell adhesion molecule)ELISA試劑盒
100mL Bis-Tris Propane,0.2M,pH7.0 Bis-Tris Propane,0.2M,pH7.0 常溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human NF-kappa-B inhibitor alpha
10U 二酯Ⅱ Phosphodiesterase Ⅱ -20℃保存TSN 瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)TSN Agar用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)(Merck方法)250
10次 克必隆eTS mRNA擴(kuò)增試劑盒
1%NaCl甘露糖 20支 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Aspartate aminotransferase, mitochondrial
操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
