一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(最好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱:短螺旋體通用熒光定量PCR試劑盒探針法
英文名稱:Brachyspira spp.
貨號:BJ-P9336
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗外包:
基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、使用方法:
實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
1g 支鏈淀粉 Amylopectin 室溫干燥保存
100mL Bicine Buffer,0.5M,pH8.0 Bicine Buffer,0.5M,pH8.0 常溫保存
50次 DNA電泳分子量標準(pBR322/BstN I) DNAMETER(3) 4℃保存
2 ug pAd/BLOCK-iT-DEST pAd/BLOCK-iT-DEST 低溫運輸,-20℃保存
支原體半流培養(yǎng)基 Mycoplasma Semi-fluid Medium 250g
1瓶 G422細胞株 G422 低溫運輸和保存
布氏肉湯添加劑(2ml/支) Brucella Broth Supplement 2ml/支*5
1000 U 限制性內(nèi)切KpnI Restriction Endonuclease -20℃保存
1mL Protease Inhibitors Cocktail for General Use Protease Inhibitors Cocktail for General Use 常溫保存
1mL 衣溶液,5mg/mL Tunicamycin Solution 4℃避光保存
2 ug pTagCFP-N pTagCFP-N 低溫運輸,-20℃保存
短螺旋體通用熒光定量PCR試劑盒探針法小鼠 CTSH 基因全長ORF克隆大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒*直銷
小鼠 PRKACA 基因全長ORF克隆大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)免疫試劑盒進口、組裝
小鼠 TPST1 基因全長ORF克隆大鼠血紅素氧合2(HO-2)免疫試劑盒進口、分裝
小鼠 CD209G 基因全長ORF克隆大鼠血紅素氧合1(HO-1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
小鼠 CTSK 基因全長ORF克隆大鼠血紅素結(jié)合蛋白(HPX)免疫試劑盒*直銷
小鼠 LGALS3BP 基因全長ORF克隆大鼠血紅蛋白(Hb)免疫試劑盒進口、組裝
小鼠 VSIG1 基因全長ORF克隆大鼠血管性血友病因子裂解(vWF-cp)免疫試劑盒進口、分裝
小鼠 TREML2 基因全長ORF克隆大鼠血管性血友病因子/瑞斯托輔因子(VWF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
小鼠 RSPO4 基因全長ORF克隆大鼠激肽(BK)免疫試劑盒*直銷
小鼠 WDR5 基因全長ORF克隆大鼠血管生成抑制因子免疫試劑盒進口、組裝
小鼠 HSPH1 基因全長ORF克隆大鼠血管生成素樣蛋白6(ANGPTL6)免疫試劑盒進口、分裝