參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：包涵體蛋白溶解及復(fù)性套裝
產(chǎn)品貨號(hào)：YS-P013261
產(chǎn)品規(guī)格： 100次
產(chǎn)品分類：PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐
的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．公司產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
人Ras-GTP酶激活蛋白1(Ras-GAP1)帕氧化蛋白質(zhì)水解酶
人N-乙酰半乳糖-6-硫酸酯酶(GAS)鹽酸洛哌丁鐵調(diào)節(jié)蛋白2抗體
人蛋白酪氨酸磷酸酶受體O(PTPRO)鹽酸洛哌丁(標(biāo)準(zhǔn)品)乙脫氫酶1型抗體
人P27蛋白(P27)酮咯酸氨丁三AFP4a蛋白抗體
人腫瘤蛋白P53(TP53)酮咯酸氨丁三（標(biāo)準(zhǔn)品）Rho GTP酶激活蛋白32抗體
人Pdgfa相關(guān)蛋白(PDAP1)蘭索拉唑能量平衡相關(guān)蛋白抗體
人Podocin蛋白(PDCN)蘭索拉唑（標(biāo)準(zhǔn)品）禽腦脊髓炎病AEV抗體
人Preptin 蛋白(Preptin)拉帕替尼腺苷酸環(huán)化酶7抗體
人胎盤鈣黏蛋白(P-Cadherin)左炔諾孕酮腺苷酸環(huán)化酶4抗體
人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-GP)左炔諾孕酮（標(biāo)準(zhǔn)品）腺苷酸活化蛋白激酶γ1抗體
人P選擇素(SELP)左旋舒利(標(biāo)準(zhǔn)品)芳香N-乙?；D(zhuǎn)移酶抗體
人Rap鳥(niǎo)嘌呤交換因子1(RAPGEF1)左利腺苷酸環(huán)化酶8抗體
人Rac-GTP酶激活蛋白1(Rac-GAP1)L-甲狀腺素鈉;四代甲狀腺素鈉鹽,T4腺苷酸環(huán)化酶10抗體
人ras同源物基因家族成員b(RHOB)利因腺苷酸環(huán)化酶5抗體
人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)利因(標(biāo)準(zhǔn)品)腺苷酸環(huán)化酶6抗體
人ras同源物基因家族成員a(RHOA)鹽酸利因腺苷酸環(huán)化酶9抗體
包涵體蛋白溶解及復(fù)性套裝CT-1/CTF1 心肌營(yíng)養(yǎng)素1抗體茉莉酸甲酯 95%
CA I 碳酸酐酶1抗體7-甲基 98%
CTNNAL1 粘附分子相關(guān)蛋白a1抗體己酸甲酯 Standard for GC,>99.5%(GC)
CA II 碳酸酐酶2抗體己酸甲酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.7% (GC)
/CSE1 凋亡敏感性基因(s)-(+)-α-甲氧基-α-(三氟苯乙酰氯 99%
Phospho-Cas (Tyr165) 磷酸化凋亡敏感性基因(+)-氯甲酸薄荷酯 97%
Caspase-1(actived) 天冬氨酸-胱氨酸特異性蛋白酶家族抗體硫代硫酸鎂 超純級(jí)
Caspase-10 半胱酸蛋白酶-10抗體三氟酮酸甲酯 97%
