服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠26S蛋白酶體(26S PSM)ELISA檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱(chēng) | Rat 26S proteasome (26S PSM) ELISA Kit |
貨號(hào) | YS-R10704 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
臭靈丹二醇 60132-35-6 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
阿奇 83905-01-5 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;100mg
白頭翁皂苷E-1 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
洋艾素 1362-42-1 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
佛司可林 66575-29-9 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
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水飛薊寧 29782-68-1 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
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千層紙素 480-11-5 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
1,8-二羥基蒽醌 117-10-2 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
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巖大戟內(nèi)酯B 37905-08-1 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
五味子丙素 61301-33-5 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
牛蒡苷元 7770-78-7 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
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大鼠26S蛋白酶體(26S PSM)ELISA檢測(cè)試劑盒植物桿菌 Lactobacillus plantarumSW579(人甲狀腺鱗細(xì)胞 )
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti許旺酵母 Schwanniomyces occidentalis
NRK-52E(大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細(xì)胞)中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilusII型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)
黑球漆斑菌釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
人結(jié)腸紫杉醇耐藥公牛鏈霉菌 Streptomyces tauricus
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae大鼠正常腎成纖維細(xì)胞
龜裂鏈霉菌 Bacillus mucilaginosus大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
蘇云金芽胞桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. kurstakiSiHa(人子宮頸鱗細(xì)胞)
大鼠牙細(xì)胞*培養(yǎng)基桿菌屬 Lactobacillus sp.
香菇屬 Lentinula sp.根瘤菌
香菇 Lentinula edodesUACC-812(人腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞)
293T(人胚腎細(xì)胞)日本根霉 Rhizopus japonicus
藤黃微球菌 Micrococcus luteus網(wǎng)狀鐮孢
苜蓿中華根瘤菌蘇云金芽胞桿菌達(dá)爾可他亞種 Bacillus thuringiensis subsp. dakota
RBE(人膽管細(xì)胞)HK-2(人腎小管上皮細(xì)胞)
操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。