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大鼠神經(jīng)肽Y(NPY)ELISA試劑盒使用說明書

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大鼠神經(jīng)肽Y(NPY)ELISA試劑盒操作步驟
標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為90pg/ml,60pg/ml ,30pg/ml,15pg/ml,7.5pg/ml)。
加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
大鼠神經(jīng)肽Y(NPY)ELISA試劑盒測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
膜結合 DNA 清除試劑盒    ConA 糖蛋白分離試劑盒        
膜結合 DNA 清除試劑盒    DTT,蛋白        
明膠溶液,2%,PCR     聚乙二醇溶液        
明膠溶液,2%,PCR     CN/DAB 底物套裝         
明膠溶液,2%,PCR     ATP 硫酸化酶        
明膠    Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 )        
明膠    CM 交換介質(zhì)        
明膠    前脂肪細胞生長因子        
免質(zhì)粒提取篩選試劑盒    葡萄糖 -6- 磷酸脫氫酶        
免質(zhì)粒提取篩選試劑盒    Cisplatin(DNA 交聯(lián)劑 / 細胞凋亡誘導劑 )        
免質(zhì)粒提取篩選試劑盒    Afu 尿嘧啶 -DNA 糖基化酶        
免疫學技術服務    硫酸慶大霉素溶液 ,15mg/mL        
免疫共沉淀技術服務    地塞米松溶液 ,50mg/mL        
免疫蛋白清除劑    真空抽濾盒 
大鼠神經(jīng)肽Y(NPY)ELISA試劑盒       

 

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