產(chǎn)品名稱：A-498(人腎癌細(xì)胞)運(yùn)輸
英文名稱：A-498 (human renal carcinoma cells)
規(guī)格：5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號：FS-X0811
A-498(人腎癌細(xì)胞)運(yùn)輸的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2）請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長滿（90%以上）請及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
A-498(人腎癌細(xì)胞)運(yùn)輸培養(yǎng)操作流程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基（F-12K，GIBCO,貨號21127-022），90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1，細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細(xì)胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
GP- II b III a/CD41+CD61(Mouse plaet membrane glycoprotein II b III a) ELISA Kit 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
Human ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit 人卵巢癌標(biāo)志物CA125 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
AFP(Human Alpha-fetoprotein) ELISA Kit 人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
FFA(Mouse free fatty acids) ELISA Kit 小鼠游離脂肪酸 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
ALP-B ELISA Kit 大鼠骨特異性堿性磷酸酶B 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
TSP-1(Mouse thrombospondin 1) ELISA Kit 小鼠血小板反應(yīng)蛋白/*敏感蛋白1 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
CEA/CD66(Human carcinoembryonic antign) ELISA Kit 人癌胚抗原 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
TFR/CD71 ELISA Kit 大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
TIMP-4(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 4) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
ON(Mouse osteonectin) ELISA Kit 小鼠骨粘連蛋白 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
Cys-C ELISA Kit 大鼠半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
FA(Mouse Folic acid) ELISA Kit 小鼠* 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
TIMP-3(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
F VIII Ag ELISA Kit 大鼠第八因子相關(guān)抗原 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
TIMP-2(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
M2-PK ELISA Kit 大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
A-498(人腎癌細(xì)胞)運(yùn)輸histon-H2b(Mouse histon-H2b) ELISA Kit 小鼠組蛋白H2b 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
AChRab ELISA Kit 大鼠乙酰*受體抗體 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
OSM(Human Oncostatin-M) ELISA KIT 人抑瘤素M 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
VCAM-1/CD106(Mouse Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
GR(Mouse glucocorticoid receptor) ELISA Kit 小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
GABA ELISA Kit 大鼠γ氨基丁酸 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
SP-D(Human Pulmonary surfatcant-associated protein D) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
