產(chǎn)品名稱：Hepa 1-6 小鼠肝癌細(xì)胞保存
英文名稱：Hepa1-6mouse hepatoma cell line
規(guī)格：5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-X0111
Hepa 1-6 小鼠肝癌細(xì)胞保存的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2）請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長(zhǎng)滿（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
Hepa 1-6 小鼠肝癌細(xì)胞保存培養(yǎng)操作流程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基（F-12K，GIBCO,貨號(hào)21127-022），90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1，細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細(xì)胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
分子式： C47H51NO14 853.91 20mg
三尖杉寧堿 英文名稱： Cephalomannine : 71610-00-9 分子式： C45H53NO14 831.9 20mg
10－脫乙酰基巴卡丁III 英文名稱： 10-Deacetylbaccatin III : 32981-86-5 分子式： C29H36O10 544.59 20mg
多烯* 英文名稱： Docetaxel : 114977-28-5 分子式： C43H53NO14 807.88 20mg
7-表* 英文名稱： 7-Epitaxol : 105454-04-4 分子式： C47H51NO14 853.913 20mg
7-表-10-去乙?；?（95%） 英文名稱： Deacetyltaxol；10-Deacetyltaxol : 78432-77-6 分子式： C45H49NO13 811.87 20mg
D(+)-半乳糖 英文名稱： D-Galactose : 59-23-4 分子式： C6H12O6 180.16 20mg
* 英文名稱： D(+)-Glucose : 50-99-7 分子式： C6H12O6 180.16 100mg
棉籽糖 英文名稱： D(+)-Raffinose pentahydrate : 17629-30-0 分子式： C18H42O21 594.51 20mg
3,6’-二芥子?；崽牵?0%） 英文名稱： 3,′6-d isinapoyl sucrose : 分子式： C36H46O17 "754
" 20mg
蔗糖 英文名稱： Sucrose : 57-50-1 分子式： C12H22O11 342.3 100mg
耐斯糖 英文名稱： Nystose : 13133-07-8 分子式： C24H42O21 666.58 20mg
苦杏仁苷 英文名稱： Amygdalin : 29883-15-6 分子式： C20H27 457.43 20mg
扁桃酸 英文名稱： Mandelic acid : 611-71-2 分子式： C8H8O3 152.15 20mg
長(zhǎng)春新堿 英文名稱： Vincristine : 57-22-7 分子式： C46H56N4O10 824.96 20mg
長(zhǎng)春花堿 英文名稱： Vinblastine : 865-21-4 分子式： C46H58N4O9 810.97 20mg
長(zhǎng)春質(zhì)堿 英文名稱： Catharanthine : 2468-21-5 分子式： C21H24N2O2 336.43 20mg
文多靈 英文名稱： Vindoline : 2182-14-1 分子式： C25H32N2O6 456.53 20mg
長(zhǎng)春瑞濱 英文名稱： VINORELBINE : 71486-22-1 分子式： "C45H54N4O8
" 778.94 20mg
長(zhǎng)春胺 英文名稱： Vincamine : "1617-90-9
" 分子式： "C21H26N2O3
" 354.44 20mg
* 英文名稱： Vinpocetine : 42971-09-5 分子式： C22H26N2O2 350.46 20mg
川續(xù)斷皂苷乙 英文名稱： Dipsacoside B : 33289-85-9 分子式： C53H86O22 1075.24 20mg
Hepa 1-6 小鼠肝癌細(xì)胞保存川續(xù)斷皂苷Ⅵ 英文名稱： Akebia saponin D : 39524-08-8 分子式： C47H76O18 929.099 20mg
* 英文名稱： Hesperidin : 520-26-3 分子式： C28H34O15 610.56 20mg
橙皮素 英文名稱： "Hesperetin
" : 520-33-2 分子式： C16H14O6 302.28 20mg
橘皮素 英文名稱： Tangeretin : 481-53-8 分子式： C20H20O7 372.37 20mg
甲基*（95%） 英文名稱： Methyl hesperidin : 11013-97-1 分子式： C29H36O15 624.59
