ATPase,人ATP酶ELISA試劑盒供應(yīng)商
- 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人ATP酶（ATPase）的含量。
- 有效期：6個月
- 保存條件：2-8℃
- 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被人ATP酶（ATPase）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人ATP酶（ATPase）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
標(biāo)本收集
1. 本試劑盒可使用血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織液標(biāo)本。
2. 室溫（20－25℃）下保存標(biāo)本不要超過8小時。2－10℃保存標(biāo)本，不超過48小時。如
耽擱的時間更長，請在-20℃或更低的溫度下保存標(biāo)本。標(biāo)本避免多次凍融，這樣可能會損失蛋白活性，產(chǎn)生錯誤結(jié)果。
準(zhǔn)備工作
1. 濃縮洗滌液(20X)用雙蒸水稀釋成1X(至 500ml)。
操作步驟
試劑盒應(yīng)平衡至室溫（20-25°C ）再試驗。 取出所需反應(yīng)板。
1. 加入10ul標(biāo)準(zhǔn)品(Standards)、10ul標(biāo)本于相應(yīng)反應(yīng)板孔中。
2. 每孔加入40ul Anti mouse IL-1 Biotin 和40ul Anti mouse IL-1 POD。輕輕混勻30秒，封
住板孔，室溫溫育 45分鐘。
3. 洗板：甩盡板內(nèi)液體，用洗滌液洗滌反應(yīng)板（每孔內(nèi)加入350ul洗滌液），并去除水滴
（在厚疊吸水紙上拍干）；反復(fù)洗滌5次。
4. 每孔加入100ul顯色液， 輕輕混勻10秒，室溫溫育20分鐘。
5. 每孔加入100ul終止液（Stop Solution）。輕輕混勻30秒；30分鐘內(nèi)在450nm處讀OD
值。
以O(shè)D值為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)樣品的OD值可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度。
