描述：(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株；(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶；(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮細(xì)胞株，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠卵巢顆粒細(xì)胞試劑盒操作 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號(hào) | CS-963420 |
收到凍存細(xì)胞的處理方法：
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞）；
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
1021868-90-5 AGN 192403 hydrochloride 10mg Fructus kochiae地膚子染料法PCR鑒定試劑盒
1021868-90-5 AGN 192403 hydrochloride 50mg Medulla junci燈心草染料法PCR鑒定試劑盒
1021868-92-7 ZM 39923 HCl 10mg Medulla junci燈心草染料法PCR鑒定試劑盒
1021868-92-7 ZM 39923 HCl 10mM(in1mLDMSO) Fructus oryzae germinatus稻芽染料法PCR鑒定試劑盒
1021868-92-7 ZM 39923 HCl 50mg Fructus oryzae germinatus稻芽染料法PCR鑒定試劑盒
p-Nitrohydrocinnamic acid 中文名： 分子式：C9H9NO4 度：98.0% 兔組織金屬蛋白酶抑制因子1 英文名稱： Rabbit Tissue Inhibitor of Metalloproteinases 1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： TIMP-1
Ethyl 3-cyclopropyl-3-oxopropanoate 中文名： 分子式：C8H12O3 度：98.0% 兔合酶 英文名稱： Rabbit Total Niic Oxide Syhase 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： T-NOS
Mecobalamin 中文名：甲鈷胺 分子式：C63H91CoN13O14P 度：98.0% γ干擾素 英文名稱： Rabbit γ Ierferon 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： IFN-γ
Terbinafine 中文名：鹽酸特比萘芬 分子式：C21H26ClN 度：98.0% 兔子組織多肽抗原(TPA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Domperidone 中文名：多潘立酮 分子式：C22H24ClN5O2 度：98.0% 兔子組胺(HIS)ELISAKit ELISA. 96T/48T
大鼠卵巢顆粒細(xì)胞試劑盒操作104594-70-9 Caffeic Acid Phenethyl Ester 10mM(in1mLDMSO) Campylobacter colic結(jié)腸彎曲桿菌PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）
104594-70-9 Caffeic Acid Phenethyl Ester 200mg Campylobacter fetus胎兒彎曲桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）
104594-70-9 Caffeic Acid Phenethyl Ester 50mg Campylobacter colic結(jié)腸彎曲桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）
104597-98-0 Methyl (S)-(-)-N-Z-Aziridine-2-carboxylate 100mg Campylobacter fetus胎兒彎曲桿菌PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）
104597-98-0 Methyl (S)-(-)-N-Z-Aziridine-2-carboxylate 1g Chlamydia felis貓衣原體探針法熒光定量PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）
注意事項(xiàng)：
1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
