公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、獼猴皮膚細(xì)胞;MMS4說明書技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù),其細(xì)胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫(kù),以及部分國(guó)內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 獼猴皮膚細(xì)胞;MMS4說明書
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來源于一雌性獼猴的皮膚組織。2000年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%FBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
獼猴皮膚細(xì)胞;MMS4說明書處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請(qǐng)及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請(qǐng)及時(shí)。
4、嚴(yán)格無菌操作,拆下封口膜,如果細(xì)胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠,可進(jìn)行離心收集細(xì)胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細(xì)胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí):
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購(gòu)買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購(gòu)買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
牛肉粉:3.0
化鈉:5.0g
瓊脂:14.0
PH:7.0-7.4
用法:稱取本品33克,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝三角瓶,115℃高壓滅菌30分鐘后備用
標(biāo)準(zhǔn):中國(guó)藥典2010年版
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:淺黃色粉末。易潮解。加水煮沸溶化后呈淺黃色半透明液體,冷至45℃開始凝固。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌培養(yǎng),藥敏前增菌稀釋
〖保存〗:RT
3%化鈉堿性蛋胨水
〖英文名稱〗:Alkaline Peptone Water;3% NaC1 Alkaline Peptone water
〖其他名稱〗:3%化鈉堿性蛋胨水
〖級(jí)別〗:BR
蛋胨:10.0g
化鈉:30.0g
PH:8.3-8.7
用法:稱取本品40克,加蒸餾水1000ml,加熱煮沸直至*溶解,121℃滅菌10分鐘,備用
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:粉末。易潮解。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)用于副溶血性弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)
〖保存〗:RT
血瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基
〖英文名稱〗:Blood Agar Base
〖其他名稱〗:血瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基;血液瓊脂基礎(chǔ)
〖級(jí)別〗:BR
胨:10.0g
瓊脂:20.0g
化鈉:5.0g
肉浸粉:10.0g
獼猴皮膚細(xì)胞;MMS4說明書PH:7.2±0.2
用法:稱取本品45克,加入1000ml蒸餾水中,加熱煮沸溶解,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘,待冷至50℃左右,以無菌操作吸取無菌脫纖維兔血或羊血50ml-100ml加入搖勻,制成平板,置冰箱內(nèi),備用
質(zhì)量控制:參照中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范2000版標(biāo)準(zhǔn)配方配制,用標(biāo)準(zhǔn)菌株檢驗(yàn)符合質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:淡黃色粉末。易潮解。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)加血液制成平板后,供分離營(yíng)養(yǎng)要求較高的致病