細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
產品屬性:
產品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號 |
大鼠羊膜胚胎細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 原代細胞 | GOY-01X1359 |
產品介紹:
名稱 大鼠羊膜胚胎細胞
2.組織來源:胎盤組織
3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:
大鼠胚胎羊膜細胞分離自羊膜組織;羊膜為單層上皮細胞互相連接構成的薄膜。單層上皮細胞具有分泌羊水的作用。隨著胚胎的生長發(fā)育,羊膜與絨毛密切緊貼,形成胎膜。胎膜隨著羊膜腔逐漸擴大而呈半透明的薄膜,無血管,富有韌性(胎膜也就是羊膜腔的囊壁)。羊膜腔內充滿的液體為羊水。羊膜僅覆蓋在胎盤的兒體面,并不深入胎盤組織中,隨著妊娠的進展羊膜腔逐漸擴大,占據整個子宮腔,羊膜是胎膜最內一層,是一層半透明的薄膜,與覆蓋在胎盤、臍帶的羊膜層相連接。羊膜是胎盤的最內層,與人眼結膜組織結構相似,含有眼表上皮細胞,包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質,其光滑,無血管、神經及淋巴,具有一定的彈性,厚0.02~0.5mm,在電鏡下,其分為五層:上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層,羊膜基底膜和羊膜基質層含有大量不同的膠元,主要為i、iii、iv、v、vii型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份,正是這些成份使羊膜可以充當“移植的基底膜”而發(fā)揮一種新的健康合適的基質。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質細胞組成,均具有多分化潛能,可轉化為神經元,且還有合成、釋放生物活性物質和神經營養(yǎng)因子的功能。
5.方法簡介:
()實驗室分離的大鼠羊膜胚胎細胞采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質量檢測:
()實驗室分離的大鼠羊膜胚胎細胞經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
產品貨號CM-R234
換液頻率每2-3天換液一次
生長特性貼壁
細胞形態(tài)梭形、多角形
傳代特性可傳3代左右
消化液0.25%
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%
處理方法:
收到細胞后,檢查外包裝是否完整,細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時聯(lián)系。并進行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3. 預熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。
4. 顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5. ①若細胞密度較小,無菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上,進行傳代。
實驗操作步驟:
a.采用認可的方案處死嚙齒動物。
b.立即在無菌超凈臺內用70%乙醇擦洗整個動物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得最佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,
避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗
并*清除殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
2.5g 木聚糖 Xylan 室溫干燥保存
1000支 10 μL RNase-free 白吸頭(袋裝) 常溫
100 T 過氧化氫測試盒(可見光比色法) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH2.5 Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH2.5 常溫保存
5g 木瓜蛋白 Papain 4℃
大鼠羊膜胚胎細胞精肉湯 英文名稱:Arginine Broth acc. To Schubert 產品規(guī)格:250g 小鼠補體蛋白4(C4)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
曲瓊脂基礎(AFPA) 英文名稱:AFPA 產品規(guī)格:250g 小鼠補體蛋白3(C3)免疫試劑盒*直銷
假單胞分離瓊脂 英文名稱:Pseudomonas Isolation Agar 產品規(guī)格:250g 小鼠補體1抑制物抗體(C1INH)免疫試劑盒進口、組裝
雙抗巧克力瓊脂 英文名稱:Double anti-chocolate agar 產品規(guī)格:250g 小鼠波形蛋白(VIM)免疫試劑盒進口、分裝
營養(yǎng)瓊脂 英文名稱:Nutrient Agar 產品規(guī)格:250g 小鼠丙型肝炎抗體(IgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
酸性L-G培養(yǎng)基基礎 英文名稱:Acid L-G Medium Base 產品規(guī)格:250g 小鼠丙酮酸激M2型同工(M2-PK)免疫試劑盒*直銷
堿性L-G培養(yǎng)基基礎 英文名稱: 產品規(guī)格:250g 小鼠丙酮酸激(PK)免疫試劑盒進口、組裝
尿素卵黃雙糖培養(yǎng)基 英文名稱:Urea- Egg Yolk double sugar Medium 產品規(guī)格:250g 小鼠丙二酰輔A脫羧,線粒體(MLYCD)免疫試劑盒進口、分裝
麥康凱瓊脂(含結晶紫) 英文名稱: 產品規(guī)格:250g 小鼠丙二酸單酰輔A(malonyl CoA) 免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
溶血(0.1%)赫氏瓊脂 英文名稱:Hottinger's Agar 產品規(guī)格:250g 小鼠丙二醛(MDA)免疫試劑盒*直銷