細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對(duì)象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號(hào) |
大鼠腦微血管周細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 原代細(xì)胞 | GOY-01X1329 |
產(chǎn)品介紹:
名稱 大鼠腦微血管周細(xì)胞
2.組織來源:大腦組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠腦微血管周細(xì)胞分離自腦微血管;大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。周細(xì)胞(pericyte)又稱Rouget細(xì)胞和壁細(xì)胞,是一種包圍全身毛細(xì)血管和靜脈中內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞,可以收縮。周細(xì)胞嵌入毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的基膜中,通過物理接觸和旁分泌信號(hào)與內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞通訊,監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細(xì)胞的成熟過程。此外,周細(xì)胞還具有調(diào)控毛細(xì)血管血流量、細(xì)胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用,其多功能性是目前研究的熱點(diǎn)之一,所以對(duì)血管周細(xì)胞的生物學(xué)特征、標(biāo)記物、細(xì)胞功能等的研究都為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料。周細(xì)胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控毛細(xì)血管的血流量。周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間共同擁有一個(gè)基膜,基膜上有多種細(xì)胞連接,包括多種整合素、神經(jīng)鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細(xì)血管直徑的雙向調(diào)控;毛細(xì)血管受損時(shí),周細(xì)胞還可增殖,分化為內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。
5.方法簡(jiǎn)介:
()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腦微血管周細(xì)胞采用中性-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測(cè):
()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腦微血管周細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
包被條件PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
產(chǎn)品貨號(hào)CM-R222
換液頻率每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性貼壁
細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣
傳代特性可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液0.25%
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%
處理方法:
收到細(xì)胞后,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。
4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5. ①若細(xì)胞密度較小,無菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,進(jìn)行傳代。
實(shí)驗(yàn)操作步驟:
a.采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。
b.立即在無菌超凈臺(tái)內(nèi)用70%乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,
避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗
并*清除殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
5g Folic Acid 4℃避光保存
250mL HEPES Buffer,1M,pH7.4 HEPES Buffer,1M,pH7.4 常溫保存
2mL dITP溶液,2.5mM dITP Solution,100mM -20℃保存
2 ug pLenti6/V5-lacZ pLenti6/V5-lacZ 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
TAT肉湯 250g
1瓶 MOLT-4細(xì)胞株 MOLT-4 低溫運(yùn)輸和保存
m-TEC瓊脂 m-TEC Agar 250g
1.5ku 乙醇脫氫 Alcohol
大鼠腦微血管周細(xì)胞小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌成套生化鑒定管 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:10種*2套/盒*5盒 小鼠淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
改良番茄汁培養(yǎng)基 英文名稱:Tomato Juice Agar,Modified 產(chǎn)品規(guī)格:250g 小鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)免疫試劑盒*直銷
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M17瓊脂 英文名稱:M17 Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 小鼠酪羥化(TH)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
M17肉湯 英文名稱:M17 Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 小鼠跨膜蛋白97(TMEM97/MAC30)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
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