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名稱(chēng) | BT-474 [BT474] (人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
別稱(chēng) | Bt-474; BT474 |
種屬 | 人 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10μg/ml Insulin+2mM L-glutamine+20% FBS+1% P/S |
凍存條件 | 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度:液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃ |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
注意事項(xiàng) | 1、BT-474細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,細(xì)胞主要是成片生長(zhǎng); 2、匯合至80%即可傳代,細(xì)胞不會(huì)長(zhǎng)太滿(mǎn),5-6天傳代一次。 |
背景描述 | BT-474 [BT474]細(xì)胞是由E·Lasfargues和W·G·Coutinho從一個(gè)實(shí)心的乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中分離到的細(xì)胞株。 |
年齡(性別) | 女;60歲 |
組織來(lái)源 | 乳腺導(dǎo)管癌 |
細(xì)胞類(lèi)型 | 腫瘤細(xì)胞 |
腫瘤類(lèi)型 | 乳腺癌細(xì)胞 |
生物安全等級(jí) | 1 |
倍增時(shí)間 | ~84-100 hours |
致瘤性 | Yes, in Amsterdam/IMR rats with regression in 10 days.Yes, in nude mice. |
保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-7913ATCC; HTB-20 BCRC; 60359 BCRJ; 0353 DSMZ; ACC-64 |
細(xì)胞系跟細(xì)胞株的區(qū)別:
1、BT-474人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞細(xì)胞株:原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細(xì)胞的生長(zhǎng)就會(huì)出現(xiàn)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去,這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40--50代,這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。
2、細(xì)胞系:細(xì)胞株的遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變。當(dāng)細(xì)胞傳至50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)”,不能再傳下去。但是有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,并且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),有可能在培養(yǎng)條件下無(wú)限制地傳代下去,這種傳代細(xì)胞稱(chēng)為細(xì)胞系。
注意事項(xiàng):
1. 細(xì)胞較難消化,需要延長(zhǎng)消化時(shí)間,消化收縮變圓時(shí),輕拍側(cè)邊方可終止消化
2. 推薦使用培養(yǎng)基,10%胎牛血清
3. 推薦傳代比例為1:3至1:4,建議37度消化3-4分鐘
收到細(xì)胞后如何操作:
1、首先,觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)及時(shí)與我司技術(shù)支持聯(lián)系。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出進(jìn)行觀察。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
4、可將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管中,備用;細(xì)胞傳代時(shí),可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶(hù)自備的培養(yǎng)基混合使用,讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5、確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好后,應(yīng)及時(shí)將細(xì)胞凍存,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn),避免后期實(shí)驗(yàn)失誤可能發(fā)生細(xì)胞污染或死亡而導(dǎo)致的細(xì)胞丟失。
6、建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天,100X、200X、400X各拍3-5張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我們技術(shù)支持溝通交流。
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