大鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：phospho-CDKN2A/P16 (Ser140) 磷酸化抑基因p16抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-APP/ABPP (Ser730) 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
GUSB/beta glucuronidase β葡萄糖醛酸苷抗體 規(guī)格: 0.2mlTubulin-Beta 微管蛋白抗體（免疫組化用抗體）Tubu
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供最新價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞 |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
分類 | 原代細(xì)胞 |
貨號(hào) | GOY-01X1318 |
商品介紹：
名稱 大鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞
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使用方法：
收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
250g 糊精 Dextrin 室溫干燥避光保存
50T 大豆RR/SS PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
250mL 考馬斯亮藍(lán)染液 Coomassie Blue G-250 Stain Solution 常溫保存
2 ug pBC-Hygro pBC-Hygro 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
1mg 天然蛋白A Native Protein A -20℃保存
2 ug pAAV-hrGFP pAAV-hrGFP 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
GVPC瓊脂平板 GVPC Agar Plate 10個(gè)/包
大鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞改良Skirrow氏瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱：Skirrow Agar Base ,Modified 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠絨毛膜β(β-CG)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
改良Camp-BAP氏瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱：Camp-BAP Agar Base,Modified 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠絨毛膜
TTC瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱：TTC Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
甘培養(yǎng)基 英文名稱：Glycine Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠熱休克因子1(HSF1)免疫試劑盒*直銷
DNA甲基綠瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱：Dnase Agar Base with Methyl Green 產(chǎn)品規(guī)格：100 小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
布氏瓊脂 英文名稱：Brucella Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
馬尿酸鈉培養(yǎng)基 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
CCDA基礎(chǔ) 英文名稱：CCDA Base 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)免疫試劑盒*直銷
CCDA添加劑 英文名稱：CCDA Supplement 產(chǎn)品規(guī)格：2ml*5支 小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
Campy-Cefex瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱：Campy-Cefex Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠熱休克蛋白27(HSP-27)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
