大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品：7460-43-7甲基異茜草－1－甲 規(guī)格： 5mg
31178-70-8D-木糖 規(guī)格： 50mg
107-35-7?；?Taurine 規(guī)格： 20mg
171364-81-14-乙酰基頻哪酯 規(guī)格： 1G 5G;97%
527-95-7草質(zhì)；蜀葵元；蜀葵甙元；3,4′,5 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支
143-67-9長春 規(guī)格： HPLC≥
公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細胞 |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
分類 | 原代細胞 |
貨號 | GOY-01X1314 |
商品介紹：
名稱 大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細胞 2.組織來源：下腔靜脈組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細胞分離自下腔靜脈組織；下腔靜脈是體內(nèi)最大的靜脈，收集下肢、盆部和腹部的靜脈血。下腔靜脈由左、右髂總靜脈匯合而成，匯合部位多在第5腰椎水平，少數(shù)平第4腰椎。下腔靜脈位于脊柱的右前方，沿腹主動脈的右側(cè)上行，經(jīng)肝的腔靜脈溝、穿 膈的腔靜脈孔，開口于右心房。下腔靜脈的前面有肝、胰頭、十二指腸水平部、右睪丸動脈及小腸系膜根越過。后面為有膈腳、第1～4腰椎、有腰交感干和腹主動脈的壁支。右側(cè)與 腰大肌、右腎、右腎上腺相鄰，左側(cè)為腹主動脈。下腔靜脈的屬支有髂總靜脈、右睪丸靜脈、腎靜脈、右腎上腺靜脈、肝靜脈、膈下靜脈和腰靜脈，其中大部分 屬支與同名動脈伴行。 5.方法簡介： ()實驗室分離的大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： ()實驗室分離的大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R214 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)內(nèi)皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25% 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2mL 硅基磁珠 Magnetic beads,Silicic 4℃密閉、豎直保存
2 ug pACSecG2T pACSecG2T 低溫運輸，-20℃保存
R2A瓊脂平皿9cm（2-25℃） 10個/包
1瓶 BHK-21 細胞株 BHK-21 低溫運輸和保存
堿性蛋白胨水顆粒 Alkaline Peptone Water 225ml/袋*10
5000U Taq DNA聚合 Taq DNA Polymerase -20℃保存
250mL Para-formaldehyde in PBS with
大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細胞馬鈴薯液體培養(yǎng)基（含氯） 英文名稱：Potato liquid medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠瘦素(LEP)免疫試劑盒進口、組裝
改良察氏液體培養(yǎng)基 英文名稱：Modified Czapek Dox Broth Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)免疫試劑盒進口、分裝
面包酵母標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠嗜酸性粒細胞過氧化物(EPO)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
野生酵母培養(yǎng)基 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)免疫試劑盒*直銷
土麥芽提取物瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 3(Eotaxin 3)免疫試劑盒進口、組裝
霉菌培養(yǎng)基（含瓊脂和氯） 英文名稱：Fungal Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)免疫試劑盒進口、分裝
沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（含氯） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA） 英文名稱：Potato Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠結(jié)合蛋白(RBP)免疫試劑盒*直銷
賴培養(yǎng)基（LYS） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠(SS)免疫試劑盒進口、組裝
馬鈴薯葡萄糖瓊脂（USP）平板 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：9cm*10 小鼠生長激素(GH)免疫試劑盒進口、分裝
