實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；
2. 加樣（標準品及樣本）100µL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。
公司采用的全是進口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強，無效包退包換，公司提供免費代測服務，各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Rat Phosphotylinosital 3 kinase,PI3K ELISA Kit |
貨號 | GOY-R74025 |
?
樣品收集、處理及保存：
1）.細胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細胞：用PBS反復洗滌細胞3次，調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右，通過反復凍融，使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份，或者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3）血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4）血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標本：切取組織標本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果樣品不能立即檢測，應將其分裝，-70 ℃保存，避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
?
檢測程序：
1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37℃暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標儀在450 nm處測吸光值。
大鼠組織蛋白酶K(cath-K) Kit，48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用 號: 517918-95-5
人蛋白磷酸酶(PP) Kit，48T/96T 用途: 教學科研，構建大腸桿菌染色體確實菌株的出發(fā)菌株。 號: 51792-34-8
小鼠蛋白磷酸酶(PP) Kit，48T/96T 拉丁屬名: Shigla flexneri 號: 51792-34-8
裸鼠蛋白磷酸酶(PP) Kit，48T/96T 用途: 飼料添加劑生產(chǎn)菌 號: 518048-05-0
大鼠蛋白磷酸酶(PP) Kit，48T/96T 拉丁屬名: Streptomyces chromogenes 號: 51828-95-6
人磷酯酶Cγ鏈(PLCγ1) Kit，48T/96T 拉丁屬名: Aspergillus flavus Link 號: 51828-95-6
人T細胞活化連接蛋白(LAT) Kit，48T/96T 拉丁屬名: Bacillus cereus 號: 51857-17-1
小鼠T細胞活化連接蛋白(LAT) Kit，48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用 號: 51857-17-1
人整合素αⅤβ3(Integrin αⅤβ3) Kit，48T/96T 拉丁屬名: Pseudomonas sp 號: 51867-83-5
人抗SS-B/La抗體 Kit，48T/96T 拉丁屬名: Wickerhamomyces anomalus 號: 51867-83-5
人復合前列腺特異性抗原(CPSA) Kit，48T/96T 用途: 食用菌、藥用 號: 51898-34-1
大鼠復合前列腺特異性抗原(CPSA) Kit，48T/96T 拉丁屬名: Paracoccus yeei 號: 51898-34-1
人間隙連接蛋白(Cx) Kit，48T/96T 拉丁屬名: Burkholderia cepacia 號: 5190-68-1
人踝蛋白(talin) Kit，48T/96T 拉丁屬名: Flammulina vutipes 號: 5192-03-0
小鼠鈣通道阻滯劑(CCB) Kit，48T/96T 拉丁屬名: Escherichia coli 號: 5192-03-0
β-葡聚糖酶實驗步驟Human PGRN(Progranulin) KitAlias: ProgranulinKitReactivity: HumanRange: 0.313-20ng/ml
乳酸過氧化物酶保存Human CAGE1(Cancer associated gene 1 protein) KitAlias: CAGE1KitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/ml
復合酶〖穩(wěn)定劑〗DPD實驗步驟Human CFHR2(Complement factor H-rated protein 2) KitAlias: CFHR2KitReactivity: HumanRange: 0.313-20ng/ml
對甲苯胺蘭鈉鹽實驗步驟Human DSP(Dentin Sialoprotein) KitAlias: DSPKitReactivity: HumanRange: 0.781-50ng/ml
刃天青價格Human pro-ET1(Pro-endothin 1) KitAlias: pro-ET1KitReactivity: HumanRange: 15.625-1000pg/ml
蘇丹Ⅲ價格Human S100 Protein KitAlias: S100ProteinKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/ml
二乙酸螢光素保存Human KCND3(Potassium voltage-gated chann subfamily D member 3) KitAlias: KCND3KitReactivity: HumanRange: 0.313-20ng/ml
固紫B保存Human PCOL-I(Procollagen I) KitAlias: PCOL-IKitReactivity: HumanRange: 62.5-4000pg/ml
D-泛醇保存Human FOXM1(Forkhead box protein M1) KitAlias: ForkheadboxproteinM1KitReactivity: HumanRange: 15.625-1000pg/ml
L-阿拉伯糖實驗步驟Human TGT(tRNA-Guanine Transglycosylase) KitAlias: tRNA-GuanineTransglycosylaseKitReactivity: HumanRange: 0.313-20ng/ml
木糖醇價格Human EPS8(Epidermal growth factor receptor kinase substRate 8) KitAlias: EpidermalgrowthfactorreceptorkinasesubstRate8KitReactivity: HumanRange: 0.313-20ng/ml
M-腸球菌瓊脂保存Human OxHDL(Oxidized high-density lipoprotein) KitAlias: Oxidizedhigh-densitylipoproteinKitReactivity: HumanRange: 1.563-100ng/ml
侵襲性大腸桿菌PCR檢測試劑盒免費代測Human TUBA1B(Tubulin alpha-1B chain) KitAlias: Tubulinalpha-1BchainKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/ml
人皮質(zhì)醇 Kit說明書Human IFNA21(IFN alpha 21) KitAlias: IFNA21KitReactivity: HumanRange: 15.625-1000pg/ml
小鼠胎球蛋白A（Fetuin A）分析檢測試劑盒Human ProCollagen II KitAlias: Alpha1typeIIcollagen|ANFH|AOM|COL11A3|COL2A1|Collagenalpha1(II)chain|CollagenTypeII|collagen|typeII|alpha1|SEDCKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/ml
小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）分析檢測試劑盒Human ALD(Aldosterone) KitAlias: ALD(Aldosterone)KitReactivity: HumanRange: 31.25-2000pg/ml
小鼠溶菌酶（LZM）分析檢測試劑盒Human Aldolase B KitAlias: ALDB|ALDOB|LivertypealdolaseKitReactivity: HumanRange: 0.469-30ng/ml
小鼠絨毛膜促性腺激素β（β-CG）分析檢測試劑盒Human IFNA21(IFN alpha 21) KitAlias: IFNA21KitReactivity: HumanRange: 15.625-1000pg/ml
大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)elisa試劑盒人胸腺肽β4(Thymosin β4)免疫試劑盒軟骨糖蛋白39抗體10%辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷（Octyl-β-D-thioglucopyranoside）3,5-二胺 98%豌豆凝集素（PSA）ELISA試劑盒,人胸腺肽α1(Thymosin α1)免疫試劑盒癌胚抗原抗體10%辛基糖苷（Octyl β-D-Glucoside）2,4-二甲基-1- 99%乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)免疫試劑盒癌胚抗原相關細胞粘附分子8抗體10％中性Formalin固著液3,4-二胺 99%CCDA基礎用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)（WHO方法）人胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素(TSLP)免疫試劑盒C型鈉尿肽抗體100微升1厘米光徑玻璃比色皿4-硝基鄰二甲 99%艾 格瓊脂用于生產(chǎn)過程中無菌監(jiān)測（Acumedia方法）人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)免疫試劑盒組織蛋白酶K抗體100微升1厘米光徑石英比色皿3-硝基鄰二甲 99%BOC-L-酪氨酸人胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)免疫試劑盒組織蛋白酶D抗體100微升1厘米光徑塑料比色皿草酸高鐵銨 98%BOC-D-纈氨酸人胸腺表達趨化因子(TECK/CCL25)免疫試劑盒組織蛋白酶H抗體10X通用型非變性裂解液硫酸亞鐵銨，六水 AR，99.5%槐果堿 Sophocarpine人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)免疫試劑盒磷酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體10X通用型非變性裂解液硫酸高鐵銨,十二水 AR，99.0%化木蘭花堿 Magnoflorine chloride
操作步驟：
1）運用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫，防止加樣時參加很多的氣泡，發(fā)生加樣上的差錯。
2）依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定，能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3）參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動混勻，37℃溫育1小時。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應當即測定成果。
9）在450nm波利益測定各孔的OD值。
