微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 用途 | 貨號(hào) |
Slackiaequolifaciens | 僅供科研 | GOY-01J6510
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菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級(jí)種)、原種(二級(jí)種)和栽培種(三級(jí)種)三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱(chēng)種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無(wú)菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對(duì)于霉菌類(lèi)孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類(lèi)的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無(wú)機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高,營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng),適用于霉菌、酵母菌、放線(xiàn)菌及需氧細(xì)菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線(xiàn)菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
Celite® 硅藻土545 助濾劑,碳酸鈉處理,通量煅燒二乙 AR,99%Anti-DR4/APO2/TRAILR1 /FITC 熒光素標(biāo)記死亡受體4抗體IgG
環(huán)沙星 分析標(biāo)準(zhǔn)品二乙 ACS, ≥99.0% (GC)Anti-DR5/APO-2L/TRAILR2/CD262/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤調(diào)亡素/死亡受體5抗體IgG
環(huán)莠隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品氧化二丁基錫 98%(劇品)Anti-DRADA/ADAR1/FITC 熒光素標(biāo)記雙鏈RNA腺苷酸脫抗體IgG
枯草隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品氧化二丁基錫 分析標(biāo)準(zhǔn)品(劇品)Anti-DRADA/ADAR1/FITC 熒光素標(biāo)記雙鏈RNA腺苷酸脫抗體(N端)IgG
綠麥隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品氧化二辛基錫 98%Anti-DTNB/FITC 熒光素標(biāo)記肌Dystrobrevin β蛋白抗體IgG
順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙 AR,99%Anti-DTNBP1 /FITC 熒光素標(biāo)記精神分裂癥易感基因抗體IgG
鄰苯二甲酸二丁酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙 CP,98%Anti-dUTPase/FITC 熒光素標(biāo)記抗脫氧尿嘧三核苷水解抗體IgG
1,2-標(biāo)準(zhǔn)溶液100mg/L,溶劑:甲乙 色譜固定液,30℃Anti-DVL1 /FITC 熒光素標(biāo)記蓬亂蛋白1抗體IgG
Slackiaequolifaciens硫鈀,二水 水 Pd ≥44% 人組(HIS)免疫試劑盒19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框61抗體Rabbit Anti-human IgA 兔抗白A
亞鈀 Pd ≥32.6% 人足標(biāo)記蛋白/足盂蛋白(PCX)免疫試劑盒19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框77抗體Rabbit Anti-horse IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗馬IgM
氧化鉑水化物 AR,99.95% 人總蛋白S(TPS)免疫試劑盒核DNA結(jié)合蛋白C1D抗體Rabbit Anti-horse IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗馬IgM
鈀碳鈣 鈀含量, 5.0%人總蛋白C(TPC)免疫試劑盒1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框58抗體Rabbit Anti-horse IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗馬IgM
超細(xì)鉑粉 99.9%,平均粒度:0.1-0.5μm人自然抗性相關(guān)巨噬蛋白2(NRAMP-2)免疫試劑盒21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框66抗體Rabbit Anti-horse IgM/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗馬IgM
四化鉑 鉑含量,58%人自然抗性相關(guān)巨噬蛋白1(NRAMP-1)免疫試劑盒CDC42效應(yīng)蛋白3抗體Rabbit Anti-horse IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgM
海綿鉑 99.95%人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)免疫試劑盒7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框43抗體Rabbit Anti-horse IgM/PE PE標(biāo)記的兔抗馬IgM
鉑炭催化劑 Pt 5%人轉(zhuǎn)錄中介因子1-β(TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B)免疫試劑盒化非受體酪氨激c-Abl抗體Rabbit Anti-horse IgM/HRP 辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的兔抗馬IgM
海綿鈀 99.95% metals basis人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)免疫試劑盒化非受體酪氨激c-Abl抗體Rabbit Anti-horse IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗馬IgM
鉑黑 鉑含量,>99.9%,粒徑10 nm人轉(zhuǎn)錄因子SOX-5(SOX5)免疫試劑盒化非受體酪氨激c-Abl抗體Rabbit Anti-horse IgM/FITC FITC標(biāo)記的兔抗馬IgM
鈀碳 5%Pd人轉(zhuǎn)錄因子SOX-4(SOX4)免疫試劑盒化非受體酪氨激c-Abl抗體Rabbit Anti-horse IgM/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗馬IgM
硝銠溶液 10 % 溶液人轉(zhuǎn)錄因子E2F1 免疫試劑盒化非受體酪氨激c-Abl抗體Rabbit Anti-horse IgM/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗馬IgM
硝銠溶液 5 % 溶液人轉(zhuǎn)錄因子AP-1 免疫試劑盒化非受體酪氨激c-Abl抗體Rabbit Anti-horse IgM/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗馬IgM
釕粉 99.9% metals basis人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β誘導(dǎo)蛋白IG-H3(TGFBI/BIGH3)免疫試劑盒尾部結(jié)構(gòu)蛋白抗體Rabbit Anti-horse IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgM
釕粉 99.99% metals basis人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體3(TGFBR3)免疫試劑盒5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框19抗體Rabbit Anti-horse IgM/Bio 標(biāo)記的兔抗馬IgM