實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，Z后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
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儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

PCR的反應(yīng)條件：
因擴(kuò)增片段的大小、反應(yīng)體積、使用擴(kuò)增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴(kuò)增片段的大小，設(shè)定25～30個(gè)循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少，擴(kuò)增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，則會(huì)出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預(yù)備實(shí)驗(yàn)可2℃間隔進(jìn)行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進(jìn)行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時(shí)，每kbp大體可設(shè)定30秒～1分鐘；當(dāng)溫度設(shè)定在68℃以下時(shí), 時(shí)間設(shè)定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時(shí)會(huì)得不到擴(kuò)增產(chǎn)物；Anneal溫度太低時(shí)，容易發(fā)生非特異性反應(yīng)。另外，Extension時(shí)間太短時(shí)，會(huì)得不到擴(kuò)增產(chǎn)物或者會(huì)有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成；而Extension時(shí)間太長時(shí)，會(huì)出現(xiàn)Smear。

BAX(Human Bcl-2 associaed X proein) ELISA Ki  人Bcl-2相關(guān)X蛋白α-藏花素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%碳化鎢 9.8%，3-20nm Campylobacer feus

BAX (Rabbi Bcl-2 Assaciaed X proein) ELISA Ki  兔Bcl-2相關(guān)X蛋白酸黃連堿 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥95%三氧化鎢 SPCampylobacer jejuni

BALP(Human bone alkaline phosphaase) ELISA Ki  人骨堿性酸酶輪環(huán)藤堿 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%三氧化鎢 99.99% meals basisCampylobacer laridis

BALP ELISA Ki  大鼠骨堿性酸酶蝙蝠葛堿 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%三氧化鎢 比表面積15m2/g, 50nm,99.9%Campylobacer pybridis

BAFF-R(Human B cell acivaion facorr from he umor necrosis facor family recepor) ELISA Ki  人B細(xì)胞活化因子受體哈巴俄甙  分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%三氧化鎢 99.8% meals basisCampylobacer spp.

Bacillus huringiensis,B ELISA Ki  蘇云金芽孢桿菌蛋白異鉤藤堿 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%4-溴酰 96%Campylobacer spuorum

BACE2(Human bea-sie APP-cleaving enzyme 2) ELISA Ki  人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2異綠原酸B 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%對酮 97%Candida albicans

BACE2 ELISA Ki  大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2異蓮心堿 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%芐胺 AR,99.00%Candida auris

BACE1(Human Bea-sie APP-Cleaving Enzyme 1) ELISA ki  人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1蒙花苷  分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%芐胺 CP,98.5%Candida glabraa

BA(Human Blocking anibody) ELISA Ki  人封閉抗體木蘭脂素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%二二醇醋酸酯 98%Candida krusei

皂角刺LAMP鑒定試劑盒價(jià)格Mouse Srd5a1(3-oxo-5-alpha-seroid 4-dehydrogenase 1) ELISA Ki培養(yǎng)基蛋白胨水(靛基質(zhì)培養(yǎng)基)

Mouse Pou5f1(POU domain, class 5, ranscripion facor 1) ELISA Ki1%NaCl 阿拉伯糖糖發(fā)酵培養(yǎng)基基礎(chǔ)

Mouse Ido1(Indoleamine 2,3-dioxygenase 1) ELISA Ki1%NaCl   乳糖氨基酸脫羧酶試驗(yàn)基礎(chǔ)培養(yǎng)基

Mouse Fndc5(Fibronecin ype III domain-conaining proein 5) ELISA Ki1%NaCl   蔗糖三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(SI)

Mouse Nr3c1(Glucocoricoid recepor) ELISA Ki42℃生長試驗(yàn)用培養(yǎng)基三糖鐵瓊脂(SI)

Mouse Go2(Asparae aminoransferase, miochondrial) ELISA Ki無菌 42℃生長試驗(yàn)用培養(yǎng)基亞酸鐵瓊脂

Mouse Sfpc(Pulmonary surfacan-associaed proein C) ELISA Ki1%NaCl    D-纖維二糖Sandwich ELISA, Double Anibody

Mouse Prap1(Proline-rich acidic proein 1) ELISA Ki1%NaCl    D-甘露糖Compeiive ELISA, Coaed wih Anigen

Mouse Slc40a1(Solue carrier family 40 member 1) ELISA Ki1%NaCl    明膠生化管Sandwich ELISA, Double Anibody

Mouse Pgam2(PhosphoglyceRae muase 2) ELISA KiO/F 試驗(yàn)用培養(yǎng)基（HLGB）Sandwich ELISA, Double Anibody