單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細(xì)胞進行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾病:診斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
Bax抗體 | Bax | BJ-K7417 |
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細(xì)胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合,人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
3.細(xì)胞融合:淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細(xì)胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘?,將雜交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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多克隆抗體定制:
當(dāng)機體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產(chǎn)生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點,產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結(jié)合并增強巨噬細(xì)胞的吞噬功能(調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強的激活補體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細(xì)胞表面,是 B 細(xì)胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質(zhì)的人血清中可檢測到,參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
TBC1D23 aibody70-78 kDaQ9NUY8Human, Mouse, Rat
TBC1D24 aibody60-63 kDaQ9ULP9Human
TBC1D5 aibody89 kDaQ92609Human, Mouse, Rat
TBCA aibody13 kDaO75347Human, Mouse, Rat
TBCB aibody32 kDaQ99426Human, Mouse, Rat
TBCC aibody39 kDaQ15814Human, Mouse, Rat
TBCD aibody130 kDaQ9BTW9Human, Mouse, Rat
Kch樣蛋白23抗體別 名 DITHP; FLJ37812; FLJ41460; Kch like 23 (Drosophila); Kch like 23; Kch like protein 23; Kch-like protein 23; KLH23_HUMAN; KLHL 23; KLHL23; MGC22679; MGC2610; OTTHUMP00000163068.
Kch樣蛋白21抗體別 名 Kch like protein 21; KIAA0469; KLHL21; MGC99635; KLH21_HUMAN.
Kch樣蛋白24抗體別 名 DRE1; FLJ20059; FLJ25796; Kainate receptor ieracting protein for GluR6; Kch like 24 (Drosophila); Kch like protein 24; KRIP6; OTTHUMP00000211002; OTTHUMP00000212605; Protein DRE1; KLH24_HUMAN.
Bax抗體棲麥假單胞種屬: Pseudomonas│oryzihabitans提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Escherichia│coli分離基物: 雛鴨腦大腸提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1模式株: no動物疫苗培養(yǎng)基: 33生長條件: 37℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Alternaria│longipes分離基物: 枯葉提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no產(chǎn)生真素培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 26C-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
Escherichia│coli提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 304生長條件: 37℃-80℃冰箱凍結(jié)法
Streptomyces│niveoruber分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Paecilomyce│lilacinus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃
Thanatephorus│cucumeris (A.B. Frank) Donk分離基物: 馬鈴薯病葉提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no進行分析檢測及抗病性鑒定,指導(dǎo)生產(chǎn)。培養(yǎng)基: 66生長條件: 25定期移植法
Monacrosporium│effusum分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 18生長條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法
Zhouia│amylolytica分離基物: 海洋沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 223生長條件: 30℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法