基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過(guò)渡類(lèi)型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類(lèi),通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類(lèi)單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類(lèi)細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來(lái)長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱(chēng)為該菌種的一個(gè)菌株。
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規(guī)格參數(shù):
資源名稱(chēng) 新洋蔥伯克霍爾德氏菌保存
種屬: Burkholderia│cenocepacia
提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 能降解有毒大分子有機(jī)物,用于環(huán)境治理
培養(yǎng)基: 2
生長(zhǎng)條件: 37℃
存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無(wú)菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無(wú)菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長(zhǎng)條件 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,產(chǎn)品僅用于科研從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過(guò)程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱(chēng)取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
Amylin (Rabbit Amylin ) ELISA Kit 兔胰淀素 常溫,避光 規(guī)格:100mg
AFP-L2 ELISA Kit 小鼠小扁豆素結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體2 常溫,避光 規(guī)格:50mg
I CTP ELISA Kit 大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽 常溫,避光 規(guī)格:100mg
CCR1(CC-chemokine receptor 1 ELISA Kit 人CC趨因子受體1 常溫,避光 規(guī)格:50mg
cTn- I (Rabbit cardiac troponin I ) ELISA Kit 兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ 常溫,避光 規(guī)格:100mg
Tn-T (Rat Troponin T,Tn-T )ELISA Kit 大鼠肌鈣蛋白T 常溫,避光 規(guī)格:50mg
Fish Cortisol ELISA Kit 魚(yú)類(lèi)皮質(zhì) 常溫,避光 規(guī)格:50mg
AFP-L1 ELISA Kit 小鼠小扁豆素結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體1 常溫,避光 規(guī)格:100mg
MHB ELISA Kit 小鼠高鐵血紅蛋白 常溫,避光 規(guī)格:100mg
CD8 大鼠CD8分子 常溫,避光 規(guī)格:100mg
CX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1) ELISA Kit 人CX3C趨因子受體1 常溫,避光 規(guī)格:100mg
Fish high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit 魚(yú)類(lèi)超敏C反應(yīng)蛋白 常溫,避光 規(guī)格:50mg
RANKL (Rabbit receptor activator of nuclear factor kappa B ligand) ELISA Kit 兔核因子κB受體活因子配基 常溫,避光 規(guī)格:50mg
LF/LTF (Rabbit Lactoferrin) ELISA Kit 兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白 常溫,避光 規(guī)格:50mg
Fish Oste ocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit 魚(yú)骨鈣素/骨谷氨蛋白 常溫,避光 規(guī)格:100mg
犬瘟熱病毒PCR檢測(cè)試劑盒50T* 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
犬鉤端螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒50T* 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
犬布氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒50T* 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
醛縮酶測(cè)試盒24 TOxidative Stress Detection Kit* 常溫保存
醛縮酶100mgAldolase *4℃保存
醛基磁珠2mLMagnetic beads,Aldehydic *4℃密閉、豎直保存
去離子酰100mLDeionized Formamide*4℃保存
去垢劑去除樹(shù)脂10mLDetergent Erasol Resin* 常溫保存
曲拉通 X-114100mLTriton X-114*室溫保存
曲拉通 X-100100mLTriton X-100*室溫保存
pSIREN-RetroQ-DsRed-Express2 ugpSIREN-RetroQ-DsRed-Express* 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
pSIREN-Retro Q2 ugpSIREN-Retro Q* 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
pSIREN-DsRed-Express2 ugpSIREN-DsRed-Express* 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
pSIM62 ugpSIM6* 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
pSIM52 ugpSIM5* 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
pSilencer ade 1.0-CMV2 ugpSilencer ade 1.0-CMV* 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
pSilencer 5.1-U6 Retro2 ugpSilencer 5.1-U6 Retro* 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
pSilencer 5.1-H1 Retro2 ugpSilencer 5.1-H1 Retro* 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
pSilencer 4.1-CMV puro2 ugpSilencer 4.1-CMV puro* 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
pSilencer 4.1-CMV neo2 ugpSilencer 4.1-CMV neo* 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
新洋蔥伯克霍爾德氏菌保存3-Fluoro-4-nitrotoluene,99%通用試劑 1G
2-Fluoro-6-nitrotoluene,98%通用試劑 1G
Formic acid,≥95%通用試劑 100ML
AMBERLITE XAD 7HP吸附樹(shù)脂 250G
Cycloheximide (Biotechlogy Certified)通用試劑 100MG
Hydrindantin dihydrate通用試劑 5G
4-(Dimethylami)benzaldehyde,≥99.0%通用試劑 25G
2-Fluoro-5-nitrotoluene,99%通用試劑 10G
2-Fluoro-4-nitrotoluene,98%通用試劑 5G
5-Chloro-2-fluorotoluene,98%通用試劑 5ML
4-Chloro-2-fluorotoluene,≥99%通用試劑 25G
2-Chloro-6-fluorotoluene,97%通用試劑 50G
2-Chloro-4-fluorotoluene,99%通用試劑 25G
5-Bromo-2-fluorotoluene,97%通用試劑 5G
4-Bromo-3-fluorotoluene,98%通用試劑 1G