商品介紹:
測定意義: 血清總鐵結(jié)合能力指血清轉(zhuǎn)鐵蛋白可結(jié)合鐵的能力,其含量高低與缺鐵性貧血、急性肝炎等疾病的發(fā)生密切相關(guān)。 測定原理: Fe2+與菲洛嗪反應(yīng)形成紫紅色化合物,在562nm處有特征吸收峰。堿性條件下,血清轉(zhuǎn)鐵蛋白可以與Fe3+結(jié)合,剩余未結(jié)合的Fe3+可以被還原成Fe2+,此時吸光度A1與未結(jié)合Fe3+數(shù)量正相關(guān);酸化后,轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合的Fe3+釋放,并且進(jìn)一步被還原成Fe2+ ,此時吸光度A2與總Fe3+數(shù)量正相關(guān)。A2減A1與TIBC濃度呈正比。 自備實驗用品及儀器: 天平、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
血清總鐵結(jié)合能力測試盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | BJ-01611271-1 |
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
重組豬乙腦病結(jié)構(gòu)蛋白抗體孟氏假單胞菌小鼠抗胰蛋白meielisa檢測試劑盒
磷suan甲羥戊suan激酶抗體產(chǎn)黃青霉小鼠膠原酶Ielisa檢測試劑盒
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蛋白mei體PSMα4/20S Proteasome α4抗體鏈霉菌小鼠雌三elisa檢測試劑盒
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B淋巴白血病前體蛋白轉(zhuǎn)錄因子2抗體孢吸水鏈霉菌小鼠抗單核抗體elisa檢測試劑盒
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多調(diào)制因子結(jié)合蛋白1抗體凍土毛霉小鼠C型鈉尿肽elisa檢測試劑盒
B淋巴白血病前體蛋白轉(zhuǎn)錄因子3抗體香菇小鼠髓過氧化物酶elisa檢測試劑盒
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蛋白二硫鍵異構(gòu)酶P4HB抗體Pedobacter sp.小鼠去甲腎上腺suelisa檢測試劑盒
血清總鐵結(jié)合能力測試盒微量法5羥基吲哚乙suan(5-HIAA)試劑盒 Anti-TF Antibody(PB0879)PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗牛IgG
脯ansuan/精ansuan豐富端亮ansuan豐富重復(fù)蛋白(PRELP)試劑盒Anti-TFAP2A Antibody羅丹明標(biāo)記的小鼠抗牛IgG
核有絲分裂器蛋白1(NUMA1)試劑盒Anti-TFAM AntibodyFITC標(biāo)記的小鼠抗牛IgG
球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)試劑盒 Anti-TFAM Antibody性磷suan酶(AP)標(biāo)記的小鼠抗牛IgG
MAX二聚化蛋白1(mxd1)試劑盒Anti-TFEB Antibody膠體金標(biāo)記的小鼠抗牛IgG
泛su關(guān)聯(lián)蛋白2 (UBAP2)試劑盒Anti-TFF1 AntibodyCy3標(biāo)記的小鼠抗牛IgG
酮suan脫氫酶α(PDHα)試劑盒Anti-TFF1 Antibody辣根過氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗牛IgG